產(chǎn)品名稱:HT115(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10
包裝:100ul*10
分類:表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞
保存條件:4℃保存,一年有效。
注意事項(xiàng):
1. 感受態(tài)細(xì)胞好在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。?
細(xì)胞種類:
凍存
對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行凍存的方法是將細(xì)胞置于含有(DMSO)等冷凍保護(hù)劑的*培養(yǎng)基中于液氮中儲(chǔ)存。冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn),并可減緩冷卻速度嗎,大大降低冰晶形成的危險(xiǎn) (冰晶可損傷細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。
注:DMSO 可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時(shí),應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范,并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。
細(xì)胞凍存指導(dǎo)原則
凍存細(xì)胞系以備將來之用時(shí),必須遵守以下原則。與其他細(xì)胞培養(yǎng)操作一樣,我們建議您嚴(yán)格遵守您所用細(xì)胞系附帶的操作說明,以便獲得結(jié)果。
1)在高細(xì)胞濃度情況下進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,并且細(xì)胞傳代次數(shù)盡可能少。確保凍存前活細(xì)胞百分比至少為90%。請(qǐng)注意凍存條件取決于所用細(xì)胞系。
2)細(xì)胞應(yīng)緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑
4)將冷凍的細(xì)胞于 -70°C 以下溫度儲(chǔ)存;溫度高于 -50°C 時(shí),冷凍的細(xì)胞將開始變質(zhì)。
5)必須使用無菌凍存管儲(chǔ)存冷凍的細(xì)胞。裝有冷凍細(xì)胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內(nèi)保存
6)必須穿戴個(gè)人防護(hù)設(shè)備。
7)所有與細(xì)胞接觸的溶液和設(shè)備均應(yīng)為無菌狀態(tài)。必須采用正確的無菌技術(shù),并且在層流通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。
人參Panax ginseng C. A. Mey. Panaxaiol 人參三醇 32791-84-7 C30H52O4 ≥98%
γ-安基丁醋Gcmmccminobyricccid100mg/支
牙香樹Aquilaria sinensis Velin 氈毛美洲茶速 25739-41-7 C17H14O6 p-聚傘花烴(5911
中藥對(duì)照藥材鳳尾草121312-200301TLC法鑒別
Chelidonine白屈菜堿度:95%
云南鼠尾草Salvia yunnanensis Neoprzewainoneone A 甘西鼠尾新酮 A 630057-39-5 C36H28O6 ≥98.5%
酯蟾毒配基Rqsibufogqnin462-39-420mg
Datura metel 3,11,12-ixy7noxyspirovetiv-1(10)-en-2-one 3,11,12-三輕基螺旋菌-1(10)-烯-2-同 220328-03-0 C15H24O4 單元素銅溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)080604
含量測(cè)定扶派啶醇100313-200301常溫,避光50mg
pxenolsulfonphthalein 酚磺酞標(biāo)準(zhǔn)品143-74-8 100mg
王爺葵Tithonia diversifolia Tirotundin none 56377-67-4 C19H28O6 ≥95%
洋艾速cbsinthin136-4-120mg
毛蕊異黃同 Calycosin 20575-57-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
含量測(cè)定鹽酸哌羅匹隆100896-200601常溫,避光100mg
3’-甲氧基葛根素 3'-metxoxyPuerarin 117047-07-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
人chemerin ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔凝血酶原片段F1+2(F1+2)免疫試劑盒 Rabbit prothrombin fragme 1+2,F1+2 ELISA kit
前膠原C端肽酶()ELISA試劑盒 ,英文名: ELISA Kit
rabbitiercellularadhesionmolecule1,ICAM-1/CD54ELISA試劑盒兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanai-ribonucleoproteinAibody,RNP-AbELISA試劑盒人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanCholicacid,CAELISAKit人膽酸(CA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HT115(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠CXC趨化因子受體4(CXCR4)免疫試劑盒 Mouse CXC-chemokine receptor 4,CXCR4 ELISA Kit
維生素B1(VB1)ELISA試劑盒 ,英文名: VB1 ELISA Kit
MousePerinuclearai-neuophilcytoplasmicaibody,pANCAELISA試劑盒小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
bullfroggrowthhormone,GHELISA試劑盒牛蛙生長(zhǎng)激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
GuineaPigSuperOxidaseDimase,SODELISAKit豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
操作步驟:
1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。