SMMC7721-LUC熒光標(biāo)記細(xì)胞株說明書實(shí)驗(yàn)報(bào)告
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗(Abbioscience公司),然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡(Leica公司)下觀察圖像并拍照。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | SMMC7721-LUC |
價(jià)格 | 來電可享受優(yōu)惠 |
胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
主要功能:
(1)血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2)表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3)與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
變化:
(1)主動脈硬化。
(2)主動脈瘤
(3)主動脈鈣化。
基本特性:
(1)組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2)鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3)原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)每凍存管細(xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5)肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
公司耐藥細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時(shí)提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
核酸氧化8-氧脫氧鳥苷(8-oxo-dG)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20 4,4-二羥基二苯砜(>98%,BR) 4,4-Dihydroxydiphenyl sulfone 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
核桃誘導(dǎo)(DKWJuglans)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 4,5-二氯熒光素(>98%,BR) 4,5-Dichlorofluorescein 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
核桃誘導(dǎo)(DKWJuglans)*培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 對乙氧基(>98%,BR) 4-Ethoxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
赫特法病毒DNA化試劑盒10/20 4-羥>98%,BR) 4-Hydroxycoumarin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
黑色96孔板1塊 4-甲氧基酚(>98%,BR) 4-Methoxyphenol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
恒河猴主要組織相容性復(fù)合體(MHC/RhLA)ELISA檢測試劑盒Rhesusmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/RhLA 96T/48T 對甲基肉桂酸(>98%,BR) 4-Methylcinnamic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
烘培食物尿素比色法定量檢測試劑盒20 4-甲基傘形酯-N-乙酰-b-D-氨基半乳糖苷(>98%,BR) 4-Methylumbelliferyl N-acetyl-β-D-galactosaminide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
烘賠食品乙酸比色法定量檢測試劑盒20 對硝基芐醇(>98%,BR) 4-Nitrobenzyl alcohol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
烘賠食品乙酸激酶法定量檢測試劑盒20 無毒型核酸染色劑 4S Green Nucleic Acid Stain 4S Green 質(zhì)量規(guī)格:BR
烘賠食物L-天門冬酰胺化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20 5,5-二甲基-1,3-環(huán)己二酮 5,5-Dimethyl-1,3-cyclohexanedione 質(zhì)量規(guī)格:BR
小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-羥基羅格列酮β-D-葡萄糖苷酸 5-Hydroxy Rosiglitazone β-D-Glucuronide 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Rat osteoclast differeiation factor (ODF) ELISA Kit 大鼠破骨細(xì)胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒 磺胺嘧啶 Sulfadiazine 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Humanai-phospholipidaibody,Apl/APAELISAKit 人抗0脂抗體(Apl/APA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 N-乙酰基磺胺嘧啶 N-Acetyl Sulfadiazine 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Humanbetacellulin,BTCELISA試劑盒人β細(xì)胞素(BTC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 磺胺嘧啶-d4 Sulfadiazine-d4 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
植物種子甲磺酸乙脂突變誘導(dǎo)試劑盒3 辛伐他汀鈉鹽 Simvastatin, Sodium Salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Humaargetedribonuclease,ELISAKit人靶向核糖核酸酶()ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 6'-羥甲基辛伐他汀酸鈉鹽 6'-Hydroxymethyl Simvastatin Acid Sodium Salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
小鼠促甲狀腺激素(TSH)ELISA試劑盒 ,英文名: TSH ELISA Kit 3'-羥基辛伐他汀 3’-Hydroxy Simvastatin 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
大鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA檢測試劑盒Ratgrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit 96T/48T 辛伐他汀酰基-β-D葡萄糖苷酸 Simvastatin Acyl-β-D-glucuronide 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人β羥(β-OHB)免疫試劑盒 Human Beta-Hydroxybyric Acid,β-OHB ELISA Kit 辛伐他汀二聚體雜質(zhì) Simvastatin Dimer Impurity 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
英文名稱MouseAngiogeninELISAKit小鼠血管生長素(Angiogenin)規(guī)格:96T/48T 辛伐他汀,1-芘乙酰酯 Simvastatin, 1-Pyreneacetyl Ester 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
4,5-二氯熒光素(>98%,BR) 4,5-Dichlorofluorescein 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 核桃誘導(dǎo)(DKWJuglans)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
對乙氧基(>98%,BR) 4-Ethoxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 核桃誘導(dǎo)(DKWJuglans)*培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
4-羥基(>98%,BR) 4-Hydroxycoumarin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 赫特法病毒DNA化試劑盒10/20
4-甲氧基酚(>98%,BR) 4-Methoxyphenol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 黑色96孔板1塊
對甲基肉桂酸(>98%,BR) 4-Methylcinnamic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 恒河猴主要組織相容性復(fù)合體(MHC/RhLA)ELISA檢測試劑盒Rhesusmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/RhLAELISAKit 96T/48T
4-甲基傘形酯-N-乙酰-b-D-氨基半乳糖苷(>98%,BR) 4-Methylumbelliferyl N-acetyl-β-D-galactosaminide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 烘培食物尿素比色法定量檢測試劑盒20
對硝基芐醇(>98%,BR) 4-Nitrobenzyl alcohol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 烘賠食品乙酸比色法定量檢測試劑盒20
無毒型核酸染色劑 4S Green Nucleic Acid Stain 4S Green 質(zhì)量規(guī)格:BR 烘賠食品乙酸激酶法定量檢測試劑盒20
5,5-二甲基-1,3-環(huán)己二酮 5,5-Dimethyl-1,3-cyclohexanedione 質(zhì)量規(guī)格:BR 烘賠食物L-天門冬酰胺化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20
5-氟胞苷(>98%,BR) 5-Fluorocytidine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 烘賠食物L-天門冬酰胺酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20