公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。
產(chǎn)品名稱 | 5637 (膀胱癌細胞)培養(yǎng) |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 | YS-01X6322 |
產(chǎn)品名稱:5637 (膀胱癌細胞)
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
生長培養(yǎng)基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
名稱5637 (人膀胱癌細胞) (STR鑒定正確)
背景描述5637細胞能生成SCF、IL-1、IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF等。
種屬人
組織來源膀胱;癌
生長特性貼壁細胞
細胞形態(tài)上皮細胞樣
細胞類型腫瘤細胞
腫瘤類型膀胱癌細胞
生物安全等級1
生長培養(yǎng)基RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例1:3-1:4
推薦換液頻率2~3次/周
倍增時間~24-36 hours
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
致瘤性Yes, within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells.
注意事項該細胞較難消化,注意延長消化時間,消化到細胞收縮變圓,輕拍培養(yǎng)瓶側(cè)邊,細胞可以滑落方可終止消化。
培養(yǎng):
1.取出小鼠后瀝干酒精,放入超凈臺內(nèi),固定在泡沫板上。
2.用鑷子提起皮膚,用解剖剪剪開皮膚一個橫切口,將皮膚向上撕開,然后剪開肌肉等,暴露出腹腔,在左側(cè)找到脾臟,用彎頭眼科鑷取出脾臟,置于無菌培養(yǎng)皿中。
3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次,并剔除多余無用的組織。
4.將篩網(wǎng)置于平皿中,脾臟置于篩網(wǎng)上,用彎頭鑷鑷住,輕輕在篩網(wǎng)上進行碾磨,同時不停滴加不含血清的培養(yǎng)液沖洗。
5.將碾磨好的細胞懸液吸入至離心管中,離心(1000rpm,5min),吸去上清(去除血液等)。
6.加入10ml培養(yǎng)液,吹打混勻,取樣計數(shù)。
7.將稀釋好的細胞懸液分裝于培養(yǎng)瓶中,輕輕搖晃混勻,在培養(yǎng)瓶上。產(chǎn)品特點:
1.本試劑盒是單溶液式細胞增殖與細胞毒性檢測試劑,主要成分包含MTS和一個電子耦合試劑,溶液的穩(wěn)定性強,反應的靈敏度高。
2.操作簡便、快捷??芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。
3.無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
4.與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。
5.操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進一步生成。
儲存條件:低溫運輸,-20℃避光保存,有效期半年。
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
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