SW620-LUC熒光標(biāo)記細(xì)胞株胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
主要功能:
(1)血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2)表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3)與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
變化:
(1)主動脈硬化。
(2)主動脈瘤
(3)主動脈鈣化。
基本特性:
(1)組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2)鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3)原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)每凍存管細(xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5)肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗(Abbioscience公司),然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡(Leica公司)下觀察圖像并拍照。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | SW620-LUC |
價(jià)格 | 來電可享受優(yōu)惠 |
公司耐藥細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時(shí)提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
小鼠脂蛋白a(Lpa)ELISA試劑盒 ,英文名: Lpa ELISA Kit 4,4'-雙(己氧基)氧化偶氮苯(>96.0%(N)) 4,4'-Bis(hexyloxy)azoxybenzene 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(N)
小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA檢測試劑盒Mouselipoproteinα,Lp-α 96T/48T 4,4'-二戊氧基氧化偶氮苯(>95.0%(N)) 4,4'-Diamyloxyazoxybenzene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(N)
小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒 ,英文名: Lp-α ELISA Kit 4,4'-二丁氧基氧化偶氮苯 4,4'-Dibutoxyazoxybenzene 質(zhì)量規(guī)格:
小鼠脂蛋白關(guān)聯(lián)0脂酶A2(LpPLA2)ELISA試劑盒 ,英文名: LpPLA2 ELISA Kit 4,4'-二正辛氧基氧化偶氮苯(>95.0%(N)) 4,4'-Di-n-octyloxyazoxybenzene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(N)
小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA試劑盒 ,英文名: Lp-PLA2 ELISA Kit 4,4'-二壬氧基氧化偶氮苯 4,4'-Dinonyloxyazoxybenzene 質(zhì)量規(guī)格:
小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 ,英文名: Lp-PL-A2 ELISA Kit 4'-(反-4-戊基環(huán)己基)二苯基-4-甲腈(>98.0%(GC)) 4'-(trans-4-Amylcyclohexyl)biphenyl-4-carbonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
小鼠脂蛋白脂酶(LIPD)ELISA試劑盒 ,英文名: LIPD ELISA Kit 4-戊氧基(>98.0%(GC)) 4-Amyloxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA檢測試劑盒Mouselipoproteinlipase,LPL 96T/48T 4-丁氧基(>98.0%(GC)) 4-Butoxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒 ,英文名: LPL ELISA Kit 4-丁基(>95.0%(GC)) 4-Butylbenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
小鼠脂多糖(LPS)ELISA試劑盒 ,英文名: LPS ELISA Kit 4-芐氧基(>98.0%(GC)) 4-Benzyloxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
小鼠0酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1(HP1)ELISA試劑盒 ,英文名: HP1 ELISA Kit α-羥基它莫西芬 α-Hydroxy Tamoxifen 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA檢測試劑盒Humanfreehaemoglobin,f-HbELISAKit 96T/48T N-去甲基-4'-羥基它莫西芬 N-Desmethyl-4'-hydroxy Tamoxifen 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)免疫試劑盒 Rat ovalbumin specific IgE,OVA sIgE ELISA Kit N-去甲基它莫西芬鹽酸鹽 N-Desmethyl Tamoxifen Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
英文名稱RatOsteocalcinELISAKit大鼠骨橋素(Osteocalcin)規(guī)格:96T/48T (E)-4-羥基-N-去甲基它莫西芬 (E)-4-Hydroxy-N-desmethyl Tamoxifen 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
酵母氫/ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20 4-乙酰氧基它莫西芬 4-Acetoxy Tamoxifen 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
ELISAKiLN人松弛肽/松弛素規(guī)格:48T/96T N-去甲基-4-羥基它莫西芬-d5 (1:1 E/Z 混合物) N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen-d5 (1:1 E/Z Mixture) 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
小鼠級淋巴組織趨化因子6Ckine(CCL21)ELISA試劑盒 ,英文名: CCL21 ELISA Kit (Z)-4-羥基-N-去甲基它莫西芬 (同分) (Z)-4-Hydroxy-N-desmethyl Tamoxifen (mixture of isomers) 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
雞白血病病毒抗原(ALV-AG)ELISA檢測試劑盒ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AGELISAKit 96T/48T N-去甲基-4-羥基它莫西芬 (大約1:1 E/Z 混合物) N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen (approx. 1:1 E/Z Mixture) 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)免疫試劑盒 Human C-telopeptide of type Ⅱ collagen,CTX-Ⅱ ELISA Kit (Z)-4-羥基它莫西芬 (Z)-4-Hydroxytamoxifen 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
英文名稱MouseCollageypeIELISAKit小鼠I型膠原(CollageypeI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 拉寧A2 Teicoplanin A2 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
4,4'-二正辛氧基氧化偶氮苯(>95.0%(N)) 4,4'-Di-n-octyloxyazoxybenzene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(N) 小鼠脂蛋白關(guān)聯(lián)0脂酶A2(LpPLA2)ELISA試劑盒 ,英文名: LpPLA2 ELISA Kit
4,4'-二壬氧基氧化偶氮苯 4,4'-Dinonyloxyazoxybenzene 質(zhì)量規(guī)格: 小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA試劑盒 ,英文名: Lp-PLA2 ELISA Kit
4'-(反-4-戊基環(huán)己基)二苯基-4-甲腈(>98.0%(GC)) 4'-(trans-4-Amylcyclohexyl)biphenyl-4-carbonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 ,英文名: Lp-PL-A2 ELISA Kit
4-戊氧基(>98.0%(GC)) 4-Amyloxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠脂蛋白脂酶(LIPD)ELISA試劑盒 ,英文名: LIPD ELISA Kit
4-丁氧基(>98.0%(GC)) 4-Butoxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA檢測試劑盒Mouselipoproteinlipase,LPLELISAKit 96T/48T
4-丁基(>95.0%(GC)) 4-Butylbenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒 ,英文名: LPL ELISA Kit
4-芐氧基(>98.0%(GC)) 4-Benzyloxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠脂多糖(LPS)ELISA試劑盒 ,英文名: LPS ELISA Kit
4-癸氧基(>97.0%(GC)) 4-Decyloxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 小鼠脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒 ,英文名: LPS ELISA Kit
4-(己氧基)(>98.0%(GC)) 4-(Hexyloxy)benzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒 ,英文名: LBP ELISA Kit
4-庚氧基(>98.0%(GC)(T)) 4-Heptyloxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 小鼠脂肪酸合成酶(FAS)ELISA試劑盒 ,英文名: FAS ELISA Kit
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。