BEL-7402-RFP熒光標(biāo)記細(xì)胞株說明書實驗報告
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗(Abbioscience公司),然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡(Leica公司)下觀察圖像并拍照。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | BEL-7402-RFP |
價格 | 來電可享受優(yōu)惠 |
胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
主要功能:
(1)血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2)表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3)與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
變化:
(1)主動脈硬化。
(2)主動脈瘤
(3)主動脈鈣化。
基本特性:
(1)組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2)鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3)原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)每凍存管細(xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5)肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
公司耐藥細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
英文名稱HumanAquaporin5人水通道蛋白5(AQP5)規(guī)格:96T/48T 2,2-二乙氧基苯乙酮(>95.0%(GC)) 2,2-Diethoxyacetophenone 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
英文名稱Humanargininevasopressin人精氨酸加壓素規(guī)格:96T/48T 2,2-二甲氧基-2-乙酮(>98.0%(GC)) 2,2-Dimethoxy-2-phenylacetophenone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
英文名稱HumanAT-III人抗凝血酶(AT-III)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 2,4-二乙基硫雜蒽-9-酮(>90.0%(GC)) 2,4-Diethylthioxanthen-9-one 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC)
英文名稱HumanAβ1-40protein人Aβ1-40蛋白規(guī)格:96T/48T 2-乙基蒽醌(>98.0%(GC)) 2-Ethylanthraquinone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
英文名稱HumanAβ1-42protein人Aβ1-42蛋白規(guī)格:96T/48T 1-羥環(huán)己基苯酮(>98.0%(GC)) 1-Hydroxycyclohexyl Phenyl Ketone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
英文名稱HumanB1-AR人心肌細(xì)胞膜B1-AR規(guī)格:96T/48T 二苯基鎓六氟鹽(>97.0%(T)) Diphenyliodonium Hexafluorophosphate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)
英文名稱HumanBAFF人B細(xì)胞活化因子(BAFF)規(guī)格:96T/48T 2-(4-甲氧苯基)-4,6-雙(三氯甲基) -1,3,5-三嗪(>98.0%(GC)) 2-(4-Methoxyphenyl)-4,6-bis(trichloromethyl)-1,3,5-triazine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
英文名稱HumanBAFF-R人B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)規(guī)格:96T/48T 三苯基化锍(>98.0%(T)) Triphenylsulfonium Bromide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
英文名稱HumanBALP人BALP規(guī)格:96T/48T *基[3-(三乙氧基硅基)丙基]氯化銨(>98.0%(T)) Trimethyl[3-(triethoxysilyl)propyl]ammonium Chloride 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
英文名稱HumanBetacellulin人BTC規(guī)格:96T/48T 1-[3-(*氧基硅基)丙基]脲(>94.0%(N)) 1-[3-(Trimethoxysilyl)propyl]urea 質(zhì)量規(guī)格:>94.0%(N)
小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 (S)-布洛芬 (S)-Ibuprofen 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Rat prostaglandin E1 (PGE1) ELISA Kit 大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒 依那普利 Enalapril 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Humancirculatingimmunecomplex,CICELISAKit 人循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 1,3-二芐基-5-氟尿嘧啶 1,3-Dibenzyl-5-fluorouracil 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Humanbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2ELISA試劑盒人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1,3-二(芐氧基甲基)-5-氟尿嘧啶 1,3-Di(benzyloxymethyl)-5-fluorouracil 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
植物總RNA化試劑盒(高多糖/酚)20 5-氟乳清酸水合物 5-Fluoroorotic acid hydrate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
HumanSurfactaProteinA,SP-AELISAKit人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 5-氟-1,3-二甲基尿嘧啶 5-Fluoro-1,3-dimethyluracil 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
小鼠程序性死亡1(PD-1)ELISA試劑盒 ,英文名: PD-1 ELISA Kit 5-氟尿嘧啶核苷 5-Fluorouridine 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
大鼠肝脂酶(HL)ELISA檢測試劑盒Rathepaticlipase,HLELISAKit 96T/48T 5-氟二氫嘧啶-2,4-二酮 5-Fluorodihydropyrimidine-2,4-dione 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人β-防御素3 免疫試劑盒 Human β-defensins 3 ELISA Kit 舒馬曲坦-d6 Sumatriptan-d6 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
英文名稱MouseangiotensionⅠELISAKit小鼠血管緊張素I(AngI)規(guī)格:96T/48T 舒馬曲坦-d6琥珀酸鹽 Sumatriptan-d6 Succinate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
2-乙基蒽醌(>98.0%(GC)) 2-Ethylanthraquinone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱HumanAβ1-40proteinELISAKit人Aβ1-40蛋白規(guī)格:96T/48T
1-羥環(huán)己基苯酮(>98.0%(GC)) 1-Hydroxycyclohexyl Phenyl Ketone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱HumanAβ1-42proteinELISAKit人Aβ1-42蛋白規(guī)格:96T/48T
二苯基鎓六氟鹽(>97.0%(T)) Diphenyliodonium Hexafluorophosphate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T) 英文名稱HumanB1-ARELISAKit人心肌細(xì)胞膜B1-AR規(guī)格:96T/48T
2-(4-甲氧苯基)-4,6-雙(三氯甲基) -1,3,5-三嗪(>98.0%(GC)) 2-(4-Methoxyphenyl)-4,6-bis(trichloromethyl)-1,3,5-triazine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱HumanBAFFELISAKit人B細(xì)胞活化因子(BAFF)規(guī)格:96T/48T
三苯基化锍(>98.0%(T)) Triphenylsulfonium Bromide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 英文名稱HumanBAFF-RELISAKit人B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)規(guī)格:96T/48T
*基[3-(三乙氧基硅基)丙基]氯化銨(>98.0%(T)) Trimethyl[3-(triethoxysilyl)propyl]ammonium Chloride 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 英文名稱HumanBALPELISAKit人BALP規(guī)格:96T/48T
1-[3-(*氧基硅基)丙基]脲(>94.0%(N)) 1-[3-(Trimethoxysilyl)propyl]urea 質(zhì)量規(guī)格:>94.0%(N) 英文名稱HumanBetacellulinELISAKit人BTC規(guī)格:96T/48T
芐酰基無色亞甲基蘭(>95.0%(HPLC)(T)) Benzoyl Leuco Methylene Blue 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(T) 英文名稱humanBeta-EndorphinELISAKIT人β-內(nèi)啡肽(Beta-Endorphin)ELISAKIT規(guī)格:96T/48T
結(jié)晶紫內(nèi)酯(>95.0%(HPLC)(T)) Crystal Violet Lactone 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(T) 英文名稱HumanbFGFELISAKit人堿性成纖維生長因子(bFGF)規(guī)格:96T/48T
6'-(二乙氨基)-1',3'-二甲基熒烷(>98.0%(HPLC)(T)) 6'-(Diethylamino)-1',3'-dimethylfluoran 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 英文名稱HumanBLC-1/CXCL13ELISAKit人B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)規(guī)格:96T/48T