公司產(chǎn)品僅用于科研測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
產(chǎn)品名稱:吲哚乙酸氧化酶(IAAO)試劑盒品牌
規(guī)格:24樣、48樣、
貨號:GOY-016356
檢測方法:可見分光光度法、微板法
產(chǎn)品分類:氧化應(yīng)激系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月
【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】
配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù)
溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。
配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19
稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量
配制洗滌液。
配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份
濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。
【所用儀器、試劑】
儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b
置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g )
微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl
試 劑:乙腈、中性氧化鋁
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。
E2F1 轉(zhuǎn)錄因子E2F-1CD276分子(CD276)ELISA試劑盒
E2F2 轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗原CD24分子(CD24)ELISA試劑盒
E2F4 轉(zhuǎn)錄因子E2F-4抗原CD226分子(CD226)ELISA試劑盒
E2F6 轉(zhuǎn)錄因子E2F-6抗原CD200受體2(CD200R2)ELISA試劑盒
E2 tag E2 tag多肽抗原CD200受體1(CD200R1)ELISA試劑盒
EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3) 膠質(zhì)谷氨運(yùn)載3抗原CD200分子(CD200)ELISA試劑盒
EBNA-3 (EpsteinBarr nuclear gens 3) EB病編碼核-3(抗原)CD163分子(CD163)ELISA試劑盒
ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1) 內(nèi)皮轉(zhuǎn)化1抗原CD160分子(CD160)ELISA試劑盒
ECE2(Endothelin Converting Enzyme 2) 內(nèi)皮轉(zhuǎn)化2抗原CD14分子(CD14)ELISA試劑盒
ECP(eosinophil cationic protein)mouse rat 嗜性粒陽離子抗原CD109分子(CD109)ELISA試劑盒
ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1) 外胚層發(fā)育不良抗原CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合γ(CEBPγ)ELISA試劑盒
rhEGF(rh-Epidermal growth factor) 重組長因子CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合β(CEBPβ)ELISA試劑盒
EGF(Epidermal growth factor)rat 重組表皮生長因子抗原(大鼠)CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合α(CEBPα)ELISA試劑盒
EGFL7(EGF-like domain containing protein 7) 類表皮生長因子域7抗原Cathelicidin抗菌肽(CAMP)ELISA試劑盒
Egr-1(Early growth response 1) 早期反應(yīng)基因-1/應(yīng)急反應(yīng)生長基因1抗原Canopy2同源物(CNPY2)ELISA試劑盒調(diào)料D-葡萄糖鹽比色法定量檢測試劑盒20次異龍腦
乳品D-葡萄糖鹽比色法定量檢測試劑盒20次重樓皂苷 I
果菜D-葡萄糖內(nèi)脂比色法定量檢測試劑盒20次脫水穿蓮內(nèi)酯琥珀半酯
飲料D-葡萄糖內(nèi)脂比色法定量檢測試劑盒20次地膚子皂苷 Ic
食物D-葡萄糖內(nèi)脂比色法定量檢測試劑盒20次苦木
調(diào)料D-葡萄糖內(nèi)脂比色法定量檢測試劑盒20次L-色氨酯鹽鹽
乳品D-葡萄糖內(nèi)脂比色法定量檢測試劑盒20次氧化型谷
果菜D-葡萄糖激法定量檢測試劑盒20次L-酪氨乙酯
乳品D-葡萄糖激法定量檢測試劑盒20次L-酪氨叔丁酯
食物D-葡萄糖激法定量檢測試劑盒20次α-纈氨鈣鹽
糖果D-葡萄糖激法定量檢測試劑盒20次二氫鈉二水物
細(xì)胞培養(yǎng)D-葡萄糖激法定量檢測試劑盒20次3,5-二羥
果菜D-葡萄糖氧化法定量檢測試劑盒20次異槲皮苷
乳品D-葡萄糖氧化法定量檢測試劑盒20次金石蠶苷
食物D-葡萄糖氧化法定量檢測試劑盒20次紫花前胡苷
吲哚乙酸氧化酶(IAAO)試劑盒品牌甲腺原氨脫Ⅰ檢測試劑盒GTP發(fā)育調(diào)控結(jié)合1抗體
甲腺原氨脫Ⅱ檢測試劑盒骨架4.1家族DAL1抗體
25羥基維生D-1α羥化,線粒體檢測試劑盒DAP凋亡誘導(dǎo)激2抗體
1,25-二羥維生D(3)24-羥化,線粒體檢測試劑盒信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能DAB2抗體
可溶性CD23檢測試劑盒命運(yùn)決定因子DACH1抗體
抗含干擾誘導(dǎo)解旋C域1抗體檢測試劑盒Dab2相互作用抗體
腦型肌激檢測試劑盒線粒體2,4-雙烯輔A還原1抗體
胞質(zhì)5核1A抗體檢測試劑盒動力激活亞基3抗體