抗體FC驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的詳細(xì)步驟如下：

一、細(xì)胞表面染色操作

1、細(xì)胞計(jì)數(shù)：收集培養(yǎng)細(xì)胞于15mL離心管，500g離心4分鐘后，去上清。

2、制備單細(xì)胞懸液：用0.5%BSA/PBS重懸細(xì)胞，離心后再次去上清，調(diào)整濃度為1x106個(gè)細(xì)胞/mL，分到96孔板中，每孔100μl。

3、可選：阻斷Fc受體（孵育10-20分鐘）。

4、一抗孵育：每孔加入100μl稀釋的一抗，2-8℃反應(yīng)30分鐘。

5、洗滌：離心去上清后，用0.5%BSA/PBS重懸，重復(fù)洗滌兩次。

二抗孵育（非熒光抗體）：加入熒光二抗，避光孵育30分鐘。

再次洗滌，重復(fù)步驟。

重懸細(xì)胞：用0.5%BSA/PBS保存，上機(jī)分析。

二、細(xì)胞胞內(nèi)染色流程

1、細(xì)胞計(jì)數(shù)與制備同上。

2、固定：加入細(xì)胞固定劑，20分鐘后洗滌。

3、細(xì)胞通透：通透后洗滌。

4、可選：阻斷Fc受體。

磷酸化自噬相關(guān)蛋白9A抗體

商品詳情：

英文名；phospho-ATG9A (Ser735)

別    名；ATG9A (phospho Ser735); ATG9A (phospho S735); APG9 autophagy 9-like 1; APG9 like 1; APG9-like 1; APG9L1; ATG9; ATG9 autophagy related 9 homolog A; ATG9 autophagy related 9 homolog A (S. cerevisiae); ATG9A; ATG9A_HUMAN; Autophagy 9-like 1 protein; Autophagy related protein 9A; Autophagy-related protein 9A; mATG9; MGD3208; OTTHUMP00000206046; OTTHUMP00000206048; OTTHUMP00000206049; OTTHUMP00000206062.

研究領(lǐng)域；腫瘤  心血管  細(xì)胞生物  免疫學(xué)  神經(jīng)生物學(xué)  信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)  細(xì)胞凋亡  線粒體  泛素

抗體來(lái)源；Rabbit

克隆類型；Polyclonal

交叉反應(yīng)；(predicted: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, )

產(chǎn)品應(yīng)用；ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 （石蠟切片需做抗原修復(fù)）

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

理論分子量；94kDa

細(xì)胞定位；細(xì)胞漿 細(xì)胞膜 線粒體

性    狀；Liquid

濃    度；1mg/ml

免 疫 原；KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human ATG9A around the phosphorylation site of Ser735: RE(p-S)DE

亞    型；IgG

純化方法；affinity purified by Protein A

保存條件；Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事項(xiàng)：

抗體純化的方法及步驟：

抗體是一類免疫蛋白，可識(shí)別并結(jié)合特定抗原，在生物研究以及臨床應(yīng)用中，純化得到高質(zhì)量的抗體十分重要。

一、凝膠過(guò)濾層析法

凝膠過(guò)濾層析法的原理是基于抗體分子的不同大小，利用不同孔徑的凝膠過(guò)濾介質(zhì)將目標(biāo)分子（抗體）與較大分子（如蛋白質(zhì)等雜質(zhì)）分離開來(lái)。

具體操作步驟如下：

1. 將含有目標(biāo)抗體的混合物加入到預(yù)先平衡好的凝膠柱中。

2. 使用緩沖液進(jìn)行洗脫，較大分子無(wú)法通過(guò)凝膠柱而流出。

3. 目標(biāo)抗體分子大小適中，可通過(guò)凝膠柱并被保留下來(lái)。

4. 最后使用洗脫緩沖液將目標(biāo)抗體從凝膠柱中洗脫出來(lái)，得到純化的抗體。

二、親和層析法

親和層析法的原理是利用抗體分子與抗原之間的特異性結(jié)合來(lái)實(shí)現(xiàn)目標(biāo)抗體的純化。

具體操作步驟如下：

1. 將含有目標(biāo)抗體的混合物加入到預(yù)先包含特異性結(jié)合配體(如蛋白A、蛋白G等)的親和層析柱中。

2. 目標(biāo)抗體與配體之間發(fā)生特異性結(jié)合。

3. 使用洗脫緩沖液將非特異結(jié)合的組分洗脫掉。

4. 最后使用洗脫緩沖液將目標(biāo)抗體從親和層析柱中洗脫出來(lái)，得到純化的抗體。

三、離子交換層析法

離子交換層析法的原理是利用目標(biāo)抗體分子與離子交換柱中固定的離子之間的相互作用來(lái)實(shí)現(xiàn)純化。

具體操作步驟如下：
1. 將含有目標(biāo)抗體的混合物加入到預(yù)先平衡好的離子交換柱中。

2. 使用緩沖液進(jìn)行洗脫，使與固定離子相同電荷的分子無(wú)法通過(guò)離子交換柱而流出。

3. 目標(biāo)抗體由于表面電荷不同，能夠通過(guò)離子交換柱被保留下來(lái)。

4. 最后使用洗脫緩沖液改變pH或鹽濃度等條件，將目標(biāo)抗體從離子交換柱中洗脫出來(lái)，得到純化的抗體。

四、逆向相色譜法

逆向相色譜法的原理是利用目標(biāo)抗體分子與逆向相色譜柱中固定的疏水基團(tuán)之間的相互作用來(lái)實(shí)現(xiàn)純化。

具體操作步驟如下：

1. 將含有目標(biāo)抗體的混合物加入到預(yù)先平衡好的逆向相色譜柱中。

2. 使用緩沖液進(jìn)行洗脫，使疏水性較低的分子無(wú)法通過(guò)逆向相色譜柱而流出。

3. 目標(biāo)抗體由于表面疏水性不同，能夠通過(guò)逆向相色譜柱被保留下來(lái)。

4. 最后使用洗脫緩沖液改變?nèi)軇O性等條件，將目標(biāo)抗體從逆向相色譜柱中洗脫出來(lái)，得到純化的抗體。

公司正在出售的產(chǎn)品：

IL5重組狗 IL5 蛋白 Protein

OPG(Osteoprotegerin 0.5mgOPG(Osteoprotegerin) 護(hù)骨素(多肽抗原)

AGER重組人 AGER / RAGE 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

KCT2 Protein Human 重組人 KCT2 / C5orf15 蛋白

CNTF Protein Mouse 重組小鼠 CNTF / Ciliary Neurotrophic Factor 蛋白

OPG(Osteoprotegerin 0.5mgOPG(Osteoprotegerin) 護(hù)骨素(多肽抗原)

KCT2 Protein Human 重組人 KCT2 / C5orf15 蛋白

IL5重組狗 IL5 蛋白 Protein

CNTF Protein Mouse 重組小鼠 CNTF / Ciliary Neurotrophic Factor 蛋白

AGER重組人 AGER / RAGE 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

人原卟啉原氧化酶(PPOX)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human PPOX (Protoporphyrinogen Oxidase) ELISA Kit

人堿性唾液脯酸豐富蛋白1(PRB1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human PRB1 (Basic Salivary Proline Rich Protein 1) ELISA Kit

人叉頭框蛋白C1(FOXC1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human FOXC1 (Forkhead Box Protein C1) ELISA Kit

人叉頭框蛋白O1(FOXO1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human FOXO1 (Forkhead Box Protein O1) ELISA Kit

豬褪黑素(MT/MLT)檢測(cè)試劑盒

Human tissue inhibitors of metalloproteinase 1 (TIMP-1) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)檢測(cè)試劑盒

GuineaPiglipidperoxlde,LPOELISAKit 豚鼠過(guò)氧化脂質(zhì)/乳過(guò)氧化物酶(LPO)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforANKRD1(Humancardiacankyriepeatdomain1)ELISAKit人心肌錨蛋白重復(fù)域1

血液超氧化物陰離子比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Porcinegasieceptor,GsaRELISAKit豬促胃液素受體(GsaR)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat vascular endothelial cell growth factor (VEGF) ELISA Kit 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)檢測(cè)試劑盒

HumanLactoferrinaibodyIgG,LF/LTFAb-IgGELISAkit 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTFAb-Ig)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCystatinC,Cys-C檢測(cè)試劑盒人半胱蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次

HumanpodocinELISAKit人Podocin檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

磷酸化自噬相關(guān)蛋白9A抗體嗅覺受體5AR1抗體

p21活化蛋白激酶ARHG7抗體