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埃希氏菌通用PCR檢測試劑盒品牌

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公司名稱上海谷研實業(yè)有限公司
品牌
型號
所在地上海市
廠商性質經銷商
更新時間2019/4/25 10:04:40
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產品標簽:

埃希氏菌通用 Escherichia spp.PCR PCR檢測試劑盒

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公司介紹主營產品

上海谷研實業(yè)有限公司主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的銷售,主營產品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產品。銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司產品。

公司客戶遍布大學、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生、商品檢驗檢疫、制藥公司、生物技術公司和食品工業(yè)等單位。

公司主推品牌：（進口、國產） Amresco 、Sigma、 Peprotech 、Corning 、BD Faclon 、Axygen、 Invitrogen、 Qiagen、 Hyclone 、Uscnlife、 Wako 、SantaCruz、sciencell、Gibco、R&D、Linco、Amersham、Millipore。

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產品簡介在線詢價

埃希氏菌通用PCR檢測試劑盒品牌是即用型PCR試劑盒的改良產品，含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應，具有廣泛的用途。

埃希氏菌通用PCR檢測試劑盒品牌產品信息

熒光探針法檢測原理：?

熒光PCR簡述：點擊了解更多公司產品。
埃希氏菌通用PCR檢測試劑盒品牌定義：在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號的變化，通過儀器軟件實時檢測PCR擴增反應中每一個循環(huán)擴增產物量的變化，通過Ct值和標準曲線實現對起始模板的定量分析。
熒光PCR檢測分為兩種方法：熒光探針法和熒光染料法。

產品名稱	埃希氏菌通用PCR檢測試劑盒品牌
英文名稱	Escherichia spp.PCR
編號	GOY-01P466

熒光PCR如何實現實時監(jiān)控的呢？
Ø       埃希氏菌通用PCR檢測試劑盒品牌 PCR反應體系中加入熒光染料
Ø       所有的定量PCR儀器都有三個共同的組成部分（檢測器、激發(fā)光源、熱循環(huán)模塊）
Ø       在擴增過程中，熒光信號隨著PCR產物的增加而增強
Ø       每個循環(huán)結束后，定量PCR儀器通過光學系統(tǒng)記錄熒光信號的增加
Ø       PCR軟件計算出數據，用于實驗結果的分析
     ARMS檢測方法；1個SNP位點設計雙管反應，含目的基因檢測及內參檢測雙通道。

  埃希氏菌通用PCR檢測試劑盒品牌運輸及保存低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時，由于其濃度較
高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作
自備試劑 DNA 模板
使用方法一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
2. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對
照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。如果用本試劑盒自帶的天凈沙 DNA 釋放劑試用裝。則按下面。
步驟操作：
3.  埃希氏菌通用PCR檢測試劑盒品牌配制溶液 A 工作液。以配制 1mL 工作液（足夠 10 個樣品）為例：在一干凈塑料管中加入 10uL 溶液 A 成分一，20uL 溶液 A 成分二和 970uL 超純水，充分混合均勻即可。溶液 A 工作液可室溫放置，但在一周內用完，不要長期放置。一
次檢測一個樣品需要 100uL 溶液 A 工作液，1mL 工作液足夠 10 個樣品。如果待測樣品數量為其他數字，配制的溶液 A 工作液的體積需要做相應的調整。
4. 在標記好的 N+2 個離心管中，加入 1-5mg 固體樣品（半粒芝麻大?。┗?5uL 液體樣品待測樣品。在樣品制備陽性對照中加入 5uL 陽性對照，在樣品制備陰性對照中加入 5uL 水。
5. 在每個管中加入 100 uL 溶液 A 工作液，確保固體樣品被溶液淹埋，如果是液體樣品則震蕩混勻。
6. 95℃保溫 10 分鐘。
7. 待冷卻到常溫后加入 10uL 溶液 B 并混勻得 DNA 釋放液。每個樣品得到的 DNA釋放液足夠進行 50-100 次 PCR。

反應五要素：
埃希氏菌通用PCR檢測試劑盒品牌參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度：以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點，被擴增的靶序列有適宜的酶切位點，這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。