熒光PCR簡述:點擊了解更多公司產(chǎn)品。
泰國利什曼原蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格定義:在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號的變化,通過儀器軟件實時檢測PCR擴增反應(yīng)中每一個循環(huán)擴增產(chǎn)物量的變化,通過Ct值和標準曲線實現(xiàn)對起始模板的定量分析。
熒光PCR檢測分為兩種方法:熒光探針法和熒光染料法。
產(chǎn)品名稱 | 泰國利什曼原蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格 |
英文名稱 | Leishmania siamensisPCR |
編號 | GOY-01P731 |
熒光探針法檢測原理:
熒光PCR如何實現(xiàn)實時監(jiān)控的呢?
Ø 泰國利什曼原蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格 PCR反應(yīng)體系中加入熒光染料
Ø 所有的定量PCR儀器都有三個共同的組成部分(檢測器、激發(fā)光源、熱循環(huán)模塊)
Ø 在擴增過程中,熒光信號隨著PCR產(chǎn)物的增加而增強
Ø 每個循環(huán)結(jié)束后,定量PCR儀器通過光學(xué)系統(tǒng)記錄熒光信號的增加
Ø PCR軟件計算出數(shù)據(jù),用于實驗結(jié)果的分析
ARMS檢測方法;1個SNP位點設(shè)計雙管反應(yīng),含目的基因檢測及內(nèi)參檢測雙通道。
泰國利什曼原蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較
高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作
自備試劑 DNA 模板
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
2. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對
照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。如果用本試劑盒自帶的天凈沙 DNA 釋放劑試用裝。則按下面。
步驟操作:
3. 泰國利什曼原蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格配制溶液 A 工作液。以配制 1mL 工作液(足夠 10 個樣品)為例:在一干凈塑料管中加入 10uL 溶液 A 成分一,20uL 溶液 A 成分二和 970uL 超純水,充分混合均勻即可。溶液 A 工作液可室溫放置,但在一周內(nèi)用完,不要長期放置。一
次檢測一個樣品需要 100uL 溶液 A 工作液,1mL 工作液足夠 10 個樣品。如果待測樣品數(shù)量為其他數(shù)字,配制的溶液 A 工作液的體積需要做相應(yīng)的調(diào)整。
4. 在標記好的 N+2 個離心管中,加入 1-5mg 固體樣品(半粒芝麻大?。┗?5uL 液體樣品待測樣品。在樣品制備陽性對照中加入 5uL 陽性對照,在樣品制備陰性對照中加入 5uL 水。
5. 在每個管中加入 100 uL 溶液 A 工作液,確保固體樣品被溶液淹埋,如果是液體樣品則震蕩混勻。
6. 95℃保溫 10 分鐘。
7. 待冷卻到常溫后加入 10uL 溶液 B 并混勻得 DNA 釋放液。每個樣品得到的 DNA釋放液足夠進行 50-100 次 PCR。
小鼠血紅素氧合酶1(HO1)ELISA試劑盒 英文名: HO1 ELISA Kit
小鼠和肽素(CPP)ELISA試劑盒 英文名: CPP ELISA Kit
小鼠肌酐(Cr)ELISA試劑盒 英文名: Cr ELISA Kit
大鼠肌鈣蛋白I(TNI)ELISA試劑盒 英文名: TNI ELISA Kit
小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒 英文名: BGP/Gehrelin ELISA Kit
小鼠促紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒 英文名: EPO ELISA Kit
大鼠母親DPP同源物4(Smad 4)ELISA試劑盒 英文名: Smad 4 ELISA Kit
大鼠性別決定區(qū)Y框蛋白2(SOX2)ELISA試劑盒 英文名: SOX2 ELISA Kit
泰國利什曼原蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格小鼠Wnt-10b蛋白(WNT10B)ELISA試劑盒 英文名: WNT10B ELISA Kit
小鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒 英文名: GM-CSF ELISA Kit
大鼠神經(jīng)介素U(NMU)ELISA試劑盒 英文名: NMU ELISA Kit
反應(yīng)五要素:
泰國利什曼原蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。