產品名稱：延胡索酸酶（富馬酸酶）活性測定試劑盒品牌

規(guī)格：48樣、96樣、

貨號：GOY-016628

檢測方法：紫外分光光度法、微板法

產品分類：呼吸代謝途徑系列

公司產品僅用于科研貯存溫度：2～8℃。

本試劑盒保質期：6個月

【實驗前溶液配制】

配液1、將2X濃縮復溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復

溶液+1份去離子水)用于樣本的復溶。

配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19

稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量

配制洗滌液。

配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份

濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。

【所用儀器、試劑】

儀        器:微孔板酶標儀450nm/630nm、旋轉蒸發(fā)儀/氮氣吹干裝

置、均質器、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g )

微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl

試            劑:乙腈、中性氧化鋁

測定步驟：

1、 酶標儀預熱30min以上，調節(jié)波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋：將試劑三用蒸餾水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。

3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測定樣本較少，可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內用完）。

5、 樣本測定（在96孔板中依次加入下列試劑）

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

MIGF/CXCL9(Human monocyte interferon gamma inducing factor) ELISA Kit  人γ干擾誘導單核因子

ITAC/CXCL11(Human Interferon inducible T-cell Chemoattractant) ELISA Kit  人干擾誘導T趨化因子

CDl4(Human cluster Of differentiation) ELISA Kit  人CD14分子

AIF(Human apoptosis inducing factor) ELISA Kit  人凋亡誘導因子

LCA/CD45(Human leukocyte common antigen) ELISA Kit  人白共同抗原

CD4(Human cluster Of differentiation) ELISA Kit  人CD4分子

P-cad(Human Placenta Cadherin) ELISA Kit  人P鈣黏/胎盤鈣黏

KGF(Human Keratinocyte Growth Factor) ELISA Kit  人角化生長因子

PDGF-BB(Human Plaet-Derived Growth Factor-BB) ELISA kit  人血小板衍生生長因子BB

CXCL16(Human CXC-chemokine ligand 16) ELISA Kit  人CXC趨化因子配體16

CXCR3(Human CXC-chemokine receptor 3) ELISA Kit  人CXC趨化因子受體3

IFI16/p16(Human interferon-inducible protein 16) ELISA Kit  人γ干擾誘導16/p16

SDF-1a/CXCL12(Human Stromal cell derived factor 1a) ELISA Kit  人基質衍生因子1a

Lptn/LTN/XCL1(Human lymphotactin) ELISA Kit  人淋巴趨化因子

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21羥化抗體檢測試劑盒鋅指FYCO1抗體

凝血檢測試劑盒FYTTD1抗體

分泌型卷曲相關2檢測試劑盒RNA結合9抗體

α戊二脫氫檢測試劑盒巖藻糖轉移11抗體

B淋巴抗原檢測試劑盒干擾誘導15抗體

碳酐2檢測試劑盒P38相互作用抗體

環(huán)氧化2檢測試劑盒鈣粘樣28抗體

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。