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      魚γ干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作及注意事項(xiàng)

      2012年05月29日 16:52:28人氣:1247來源:上海研生生化試劑有限公司

      魚γ干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作及注意事項(xiàng)

      操作步驟

      1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

      80ng/L

      5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

      150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

      40ng/L

      4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

      150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

      20ng/L

      3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

      150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

      10ng/L

      2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

      150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

      5ng/L

      1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

      150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液



       

      2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

      3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

      魚γ干擾素(IFN-γ酶聯(lián)免疫分析試劑盒

         

      4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

      5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

      6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 

      7. 溫育:操作同3

      魚γ干擾素(IFN-γ酶聯(lián)免疫分析試劑盒

       

      8. 洗滌:操作同5。

      9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

      10. 終止:每孔加終止50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

      11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

      注意事項(xiàng)

      1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

      2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

      3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

      4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

      5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

      6.底物請(qǐng)避光保存。

      魚γ干擾素(IFN-γ酶聯(lián)免疫分析試劑盒

       

      7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

      8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

      9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

      10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

      全年征稿/資訊合作 聯(lián)系郵箱:1271141964@qq.com

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