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      人28S抗核糖體抗體ELISA檢測試劑盒操作步驟

      2020年05月13日 17:34:30人氣:113來源:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司

        人28S抗核糖體抗體ELISA檢測試劑盒操作步驟:
       
        1、費(fèi)用標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,依次進(jìn)行稀釋數(shù)倍。
       
        2、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
       
        3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
       
        4、配液:將30倍(48T 的20 倍)濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
       
        5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
       
        6、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
       
        7、溫育:操作同3。
       
        8、洗滌:操作同5。
       
        9.在確保酶標(biāo)板底無水滴及孔內(nèi)無氣泡后,立即用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測量各孔的光密度 (O.D. 值)。
       
        10、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
       
        11、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
       
        12、測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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