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      大森林埃博拉病毒PCR試劑盒實(shí)驗使用步驟

      2020年03月24日 16:23:36人氣:374來源:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司

      大森林埃博拉病毒PCR試劑盒實(shí)驗使用步驟:
      1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
      待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
      2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
      取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
      組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
      1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
      2.加樣(樣本處理區(qū))
      3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

      注:大森林埃博拉病毒PCR試劑盒所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

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