液相色譜儀作為實驗室里*的分析儀器之一，是由進(jìn)樣系統(tǒng)、高壓輸液系統(tǒng)和檢測系統(tǒng)、分離系統(tǒng)以及記錄系統(tǒng)組成。在分析之前，選取適合的色譜柱和流動相，開泵，沖洗柱子，等柱子達(dá)到平衡而且基線平直后，用微量注射器將樣品注入進(jìn)樣口，流動相把試樣帶入色譜柱進(jìn)行分離，分離后的組分再依次流入檢測器的流通池，zui后與洗脫液一起排入流出物收集器。當(dāng)樣品組分流過流通池的時候，檢測器會把組分濃度轉(zhuǎn)變成一種電信號，再經(jīng)過放大處理，通過記錄器記錄下來得到色譜圖。我們依據(jù)色譜圖來對樣品進(jìn)行定性、定量和評價柱效高低。這就是液相色譜儀的工作原理。其中液相色譜儀組成部分里zui重要的是泵。那么液相色譜儀的泵貴嗎？

液相色譜儀的泵貴嗎？柱子和簡單點的檢測器都可以自己造，但是泵就不行。高精度的泵是很重要的，不止在液相，蠕動泵在流動注射，原子熒光等都很重要。這一點必須要承認(rèn)國內(nèi)和的差距還是很大，非常大。要趕上幾乎是不可能，因為這些技術(shù)不是十幾二十年就能彌補(bǔ)的。像安捷倫、賽默也是買別人的泵，自己也造不了，或者是沒精力造。國產(chǎn)的精密儀器剛開始幾年還能用，越用越爛，zui后恨不得把機(jī)器砸了買新的。說到底還是制造業(yè)差距，國人不能安安靜靜做一個制造商，缺少工匠精神。

液相色譜儀的泵貴嗎？說到泵，又分為多元高壓泵和低壓泵，那么多元高壓泵和低壓泵的區(qū)別是什么呢：

所謂幾元，指的是能同時控制流路的多少。多元泵又分為高壓混合與低壓混合。高壓混合又叫泵后混合，多元高壓泵由多個泵構(gòu)成，有幾元則有幾個泵，例如LabAlliance的PC2001型二元高壓梯度泵、Series 4000系列的四元高壓梯度泵等。低壓混合又稱泵前混合，其實就是一個泵，幾元就是安裝幾路電磁閥，例如Agilent 1200型四元低壓梯度泵等。

四元高壓梯度：配置有四個可獨立工作的泵+在線混合器。工作方式為四個泵并聯(lián)，可同時有四個流動相，按照預(yù)先設(shè)定的配比進(jìn)入，分別送液到泵后的混合室內(nèi)，在高壓下進(jìn)行混合，混合配比更準(zhǔn)確，不易產(chǎn)生氣泡，不用為了轉(zhuǎn)換流動相而反復(fù)清洗，不僅節(jié)省溶劑，也提高了工作效率。無需增加真空脫氣機(jī)，降低了混合死體積（泵前混合時、混合管、泵頭等體積，脫氣機(jī)內(nèi)死體積）。同時，可以做梯度洗脫：當(dāng)待測樣品成分復(fù)雜，用一個固定的流動相配比無法將樣品中成分*分開時，就需要用到梯度洗脫，在同一個分析過程中由儀器自動改變流動相配比，將樣品中前期無法分離的物質(zhì)進(jìn)行洗脫，在同一譜圖中得到分開的峰的效果。有助于提高分析準(zhǔn)確性，避免了遺漏重要物質(zhì)或?qū)ζ溥M(jìn)行錯誤定性定量。

然而，四元低壓梯度：配置比較繁瑣：由單泵+低壓混合比例閥（電磁閥）+在線脫氣機(jī)+混合器構(gòu)成，它的工作方式也與高壓梯度泵有很大區(qū)別：zui多可同時有四個流動相進(jìn)入流路，按照預(yù)先設(shè)定的配比進(jìn)行混合，是依靠電磁閥的切換使泵分段輸送不同流動相，由于在常壓下混合，氣泡很容易從溶劑中析出，較易產(chǎn)生氣泡，因此必須配備在線脫氣機(jī)，可消除氣泡影響?？梢宰鎏荻认疵?，在儀器上進(jìn)行設(shè)定之后，在同一樣品分析工程中，相隔一段時間后，按照用戶的設(shè)定自行改變流動相配比，將樣品中組分分離開來。

目前HPLC儀器制造廠家大都推出四元低壓梯度（帶在線脫氣）系統(tǒng)，而在數(shù)年前大都是二元高壓梯度，以往四元低壓系統(tǒng)通常是進(jìn)口儀器的專屬產(chǎn)品，國內(nèi)大多采取高壓混合的方式，并沒有涉及到低壓系統(tǒng)的應(yīng)用開發(fā)，在國內(nèi)有些招標(biāo)項目中也有明確提出選用四元低壓的案例，廣大客戶可能會誤以為四元低壓是進(jìn)口儀器的*技術(shù)，實則不然，四元低壓實際上是對二元高壓的補(bǔ)充，也就是說當(dāng)比例發(fā)生改變的流動相數(shù)量較多，二元高壓不能滿足分析的時候，四元低壓彌補(bǔ)了這一不足。但如果比例發(fā)生改變的流動相數(shù)量在2個以內(nèi)，包括2個，應(yīng)該來說二元高壓梯度系統(tǒng)在作高精度分析時優(yōu)勢明顯。從目前的售價看，四元低壓的泵比二元高壓的并低不了太多，但他們節(jié)約的成本是不少的。

四元低壓梯度系統(tǒng)采用單泵加梯度比例閥來實現(xiàn)，因為比例閥是在泵前的，并且各流路的溶劑在比例閥里就混合在一起了，所以是泵前、低壓混合。一般地，對于常規(guī)分析來說，四元低壓梯度也可以滿足需要；如果分析樣品成份復(fù)雜、對重現(xiàn)性要求較高，或者需要在低流量下進(jìn)行梯度分析，還是選擇高壓梯度好一些。當(dāng)然，現(xiàn)在美國SSI（LabAlliance）公司推出的四元高壓梯度泵，在保證高精度分析的同時，也解決了流動相數(shù)量受限制問題。

液相色譜從性能上比較，四元高壓肯定優(yōu)于四元低壓。四元高壓的混合比例是通過改變泵的流速來獲得的，通常泵的流速都是很準(zhǔn)的，所以混合的精度也是很高的。四元低壓梯度的混合比例是通過控制不同流路的電磁閥的開閉時間長短來控制的，理論上混合的比例也是準(zhǔn)確的，但是實際上電磁閥的開閉會有一個延遲，無論它動作多么快，總還是需要一點時間的。比如A路和B路各50%混合，在單位時間內(nèi)，A路和B路的電磁閥各開通50%的時間，這時問題不大，電磁閥的延遲影響可以通過調(diào)整補(bǔ)償系數(shù)來盡量彌補(bǔ)。但是如果一點的情況，A路99%，B路1%，這種情況下單位時間內(nèi)，A路的電磁閥開通99%的時間，B路只占 1%，時間是很短的，這時B路電磁閥的延遲就影響很大了，甚至可能延遲的時間比工作的時間還要長。這是兩個管路的情況，假如四個管路同時工作，其結(jié)果可想而知。高壓梯度就不會存在這種問題了。此外，低壓還應(yīng)注意清洗，尤其使用緩沖鹽時，電磁閥送液管路很容易堵住。