国产强伦姧在线观看无码,中文字幕99久久亚洲精品,国产精品乱码在线观看,色桃花亚洲天堂视频久久,日韩精品无码观看视频免费

      您現(xiàn)在的位置:智能制造網(wǎng)>技術(shù)中心>攻克多重PCR之難的有關(guān)內(nèi)容

      直播推薦

      更多>

      企業(yè)動(dòng)態(tài)

      更多>

      推薦展會(huì)

      更多>

      攻克多重PCR之難的有關(guān)內(nèi)容

      2015年09月14日 14:42:10人氣:1345來(lái)源:上海研生生化試劑有限公司

          要一次進(jìn)行這么多種反應(yīng),我們當(dāng)然不想在反應(yīng)中缺了哪個(gè)組分。一般多重PCR需要更多的dNTP、鎂離子和聚合酶。Nichols推薦使用0.3 mM dNTP(而非標(biāo)準(zhǔn)的0.2 mM)、2.5 mM Mg2+(而非1.2至2 mM)以及每50μL反應(yīng)體系5 units聚合酶(而非1.25 units)。zui后再試試鹽濃度,“在優(yōu)化的時(shí)候,增加鹽總會(huì)有幫助,尤其能增加特異性?!?a data-cke-saved-href="http://towegas.com/st51173/list_161473.html" href="http://towegas.com/st51173/list_161473.html">ELISA試劑盒

          PCR master mix含有緩沖液、鹽、dNTP、Mg和聚合酶,如果我們使用常規(guī)1.25× 或1.5×的PCR master mix就已經(jīng)差不多做到了上述原則的三至五。另外,您還可以選用轉(zhuǎn)為多重PCR優(yōu)化的產(chǎn)品,例如NEB的多重PCR 5× Master Mix、Bio-Rad的iQ? Multiplex Powermix、或者安捷倫的Brilliant Multiplex QPCR Master Mix。

          據(jù)安捷倫的Mason介紹,Brilliant Multiplex QPCR Master Mix是經(jīng)過(guò)專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)的,能夠很好的解決同一管中不同反應(yīng)相互競(jìng)爭(zhēng)的問(wèn)題。如果一個(gè)目標(biāo)片段出現(xiàn)1000次,而另一個(gè)目標(biāo)片段只出現(xiàn)了10次,那么后一個(gè)片段就很容易淪為背景?!拔覀兊亩嘀豍CR試劑盒能夠在同一個(gè)管中準(zhǔn)確定量低豐度和高風(fēng)度的目標(biāo)片段,克服偏向性,”Mason說(shuō)。

          我能擴(kuò)多少目標(biāo)片段一般來(lái)說(shuō),zui多能在同一個(gè)管中同時(shí)檢測(cè)到五個(gè)目標(biāo)片段,這既是出于引物設(shè)計(jì)的考慮,也是由多重定量PCR的硬件條件決定的。實(shí)時(shí)熒光PCR儀通常zui多檢測(cè)4至5個(gè)顏色通道,其中一個(gè)可能還要留作參考通道。凝膠電泳雖然不受此限制,但多引物一同作用仍然存在困難,因此還是zui多達(dá)到五重PCR。 “設(shè)計(jì)更多是挑戰(zhàn)性的,”Cockrum說(shuō)。
        

          多重定量PCR的染料能進(jìn)行多重定量PCR的儀器包括:Life Tech公司的QuantStudio? 12K Flex Real-Time PCR System、安捷倫公司的Mx30005P等等。目前zui流行的選擇是HEX、FAM和VIC,而FAM/HEX和FAM/VIC是用的zui普遍的。Life Tech除了VIC外,近期又發(fā)布了兩個(gè)新染料ABY和JUN以及一個(gè)新passive reference dye——Mustang Purple。ELISA試劑盒

          Cockrum建議將染料強(qiáng)度與模板豐度結(jié)合起來(lái),用zui亮的染料(通常是FAM)配zui少的模板,用zui黯淡 的染料(例如Cy5或Quasar 705)配豐度zui高的模板(如看家基因)。

          更多重的PCR當(dāng)然,引物設(shè)計(jì)是多重PCR的zui大障礙,不過(guò)一旦克服了這一障礙我們就能進(jìn)行更多重的PCR反應(yīng)。安捷倫的MassCode技術(shù)就能夠超越定量PCR儀帶來(lái)的硬件限制,安捷倫公司將這一技術(shù)推薦給那些想要同時(shí)篩選十個(gè)以上目標(biāo)片段的用戶(hù),例如可以用來(lái)檢測(cè)病原體。ELISA試劑盒
       

      全年征稿/資訊合作 聯(lián)系郵箱:1271141964@qq.com

      免責(zé)聲明

      • 凡本網(wǎng)注明"來(lái)源:智能制造網(wǎng)"的所有作品,版權(quán)均屬于智能制造網(wǎng),轉(zhuǎn)載請(qǐng)必須注明智能制造網(wǎng),http://towegas.com。違反者本網(wǎng)將追究相關(guān)法律責(zé)任。
      • 企業(yè)發(fā)布的公司新聞、技術(shù)文章、資料下載等內(nèi)容,如涉及侵權(quán)、違規(guī)遭投訴的,一律由發(fā)布企業(yè)自行承擔(dān)責(zé)任,本網(wǎng)有權(quán)刪除內(nèi)容并追溯責(zé)任。
      • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其它來(lái)源的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)或證實(shí)其內(nèi)容的真實(shí)性,不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
      • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。

      <
      更多 >

      工控網(wǎng)機(jī)器人儀器儀表物聯(lián)網(wǎng)3D打印工業(yè)軟件金屬加工機(jī)械包裝機(jī)械印刷機(jī)械農(nóng)業(yè)機(jī)械食品加工設(shè)備制藥設(shè)備倉(cāng)儲(chǔ)物流環(huán)保設(shè)備造紙機(jī)械工程機(jī)械紡織機(jī)械化工設(shè)備電子加工設(shè)備水泥設(shè)備海洋水利裝備礦冶設(shè)備新能源設(shè)備服裝機(jī)械印染機(jī)械制鞋機(jī)械玻璃機(jī)械陶瓷設(shè)備橡塑設(shè)備船舶設(shè)備電子元器件電氣設(shè)備


      我要投稿
      • 投稿請(qǐng)發(fā)送郵件至:(郵件標(biāo)題請(qǐng)備注“投稿”)1271141964.qq.com
      • 聯(lián)系電話(huà)0571-89719789
      工業(yè)4.0時(shí)代智能制造領(lǐng)域“互聯(lián)網(wǎng)+”服務(wù)平臺(tái)
      智能制造網(wǎng)APP

      功能豐富 實(shí)時(shí)交流

      智能制造網(wǎng)小程序

      訂閱獲取更多服務(wù)

      微信公眾號(hào)

      關(guān)注我們

      抖音

      智能制造網(wǎng)

      抖音號(hào):gkzhan

      打開(kāi)抖音 搜索頁(yè)掃一掃

      視頻號(hào)

      智能制造網(wǎng)

      公眾號(hào):智能制造網(wǎng)

      打開(kāi)微信掃碼關(guān)注視頻號(hào)

      快手

      智能制造網(wǎng)

      快手ID:gkzhan2006

      打開(kāi)快手 掃一掃關(guān)注
      意見(jiàn)反饋
      關(guān)閉
      企業(yè)未開(kāi)通此功能
      詳詢(xún)客服 : 0571-87858618