非特異性背景染色的常見問題和解決辦法
常見問題 解決辦法
操作過程中漂洗不充分 每步步驟后沖洗3次,每次5分鐘
加試劑后切片干燥 防止切片干燥
組織切片折疊 勿取折疊處觀察染色結(jié)果
組織中所含過氧化物酶未阻斷 可再配制新鮮3%H20:封閉,孵育時間延長
組織中所含內(nèi)源性生物素未封閉 使用阻斷劑阻斷內(nèi)源性生物素
組織抗原 彌散 組織及時固定,固定液要符合標(biāo)準
切片黏附劑過厚 重新配制黏附劑涂片
血清蛋白封閉不充分 延長血清蛋白封閉時間或再次用2%BSA封閉
染色過強
染色過強的常見問題和解決辦法
常見問題 解決辦法
一抗?jié)舛冗^高或抗體孵育時間過長 降低一抗?jié)舛然蚩s短一抗孵育時間
孵育溫度過高,超過37℃ 蛋白 一般室溫20~28℃
生物素化二抗或SABC-POD孵育時間過長 縮短孵育時間
DAB顯色時間過長或DAB濃度過高 顯色時間不能超過5―10分鐘,以顯微鏡下觀察為準
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2025第21屆鄭州工業(yè)自動化展
展會城市:鄭州市展會時間:2025-05-09