產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱:結(jié)核分支桿菌PCR檢測試劑盒規(guī)格
規(guī)格:50T
編號:HE31868-R
類別:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。?
儲需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn):
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
保存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
紡織品中頂破強(qiáng)力 50cm×50cm 轉(zhuǎn)基因元件atsIA啟動子PCR試劑盒
紡織品中撕破強(qiáng)力(經(jīng)向、緯向) 100cm×80cm 轉(zhuǎn)基因元件atsIA啟動子染料法qPCR試劑盒
食用香料中折光指數(shù)、相對密度 100g 轉(zhuǎn)基因元件atsIA啟動子探針法qPCR試劑盒
玉米粉中素B1 鋁箔袋真空包裝,80~100g 轉(zhuǎn)基因元件CaMV35S啟動子LAMP試劑盒
玉米粉中素B1 鋁箔袋真空包裝,約80-100g 轉(zhuǎn)基因元件CaMV35S啟動子PCR試劑盒
飼料中鈣、銅、鐵、鎂、錳、鉀、鈉、鋅 鋁箔袋真空包裝,80g 轉(zhuǎn)基因元件CaMV35S啟動子染料法qPCR試劑盒
飼料中鉛 鋁箔袋真空包裝,20g 轉(zhuǎn)基因元件CaMV35S啟動子探針法qPCR試劑盒
飼料中粗蛋白質(zhì)、粗灰分、粗脂肪、粗纖維 鋁箔袋真空包裝,60g 轉(zhuǎn)基因元件CaMV35終止子LAMP試劑盒
醬油中山梨酸、甲酸 100mL 轉(zhuǎn)基因元件CaMV35終止子PCR試劑盒
醬油中氨基酸態(tài)氮、、三氯蔗糖 100~150mL 轉(zhuǎn)基因元件CaMV35終止子染料法qPCR試劑盒
果蔬汁中多效唑、噠螨靈、三唑磷、、磷 100mL 轉(zhuǎn)基因元件CaMV35終止子探針法qPCR試劑盒
飲料中環(huán)己基氨基磺酸鈉(以環(huán)己基氨基磺酸計(jì)) 100mL 轉(zhuǎn)基因元件CMoVb啟動子LAMP試劑盒
果蔬汁中三唑磷、、磷、乙酰磷 100mL 轉(zhuǎn)基因元件CMoVb啟動子LAMP試劑盒
果蔬汁中毒死蜱、氯菊酯、多效唑、噠螨靈 100mL 轉(zhuǎn)基因元件CMoVb啟動子PCR試劑盒
果蔬汁中、噠螨靈、、嘧霉胺、磷、氯菊酯 100mL 轉(zhuǎn)基因元件CMoVb啟動子PCR試劑盒
D賴氨鹽鹽 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:≥98%
D蛋氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥97%
索非布韋 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:≥98%
D鳥氨鹽鹽 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:0.95
D丙氨叔丁鹽鹽 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:0.95
D脯氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
頭孢脒;先鋒霉素18號 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>97%,BR純度:≥98%
D絲氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
D絲氨鹽鹽 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
D蘇氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
D色氨鹽鹽 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:≥98%
N乙酰D色氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:≥98%
D酪氨鹽鹽 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.99純度:≥98%
2'氧基腺;2'O基腺苷 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
D纈氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:0.97
2'脫氧鳥苷3'單二鈉 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:0.97
APC6/CDC16 細(xì)胞分裂周期蛋白16一抗 * 0.2ml Chromium(III) chloride
phosphoAPC6/CDC16(Ser560) 化細(xì)胞分裂周期蛋白16一抗 * 0.1ml Creatine, monohydra
Borealin/CDCA8 細(xì)胞分裂周期蛋白8一抗 * 0.2ml Dextran10
Bub3 有絲分裂蛋白BUB3一抗 * 0.1ml Ammomium ferric citra
Dynamitin/DCTN2 動力蛋白激活蛋白2一抗 * 0.2ml Choline chloride
EB2/End binding proin 2 微管相關(guān)末端結(jié)合蛋白2一抗 * 0.2ml DGluconolactone
INSC 有絲分裂相關(guān)蛋白INSC一抗 * 0.2ml Forchlorfenuron,4CPPU,CPPU,KT30
CENPF 有絲分裂著絲粒蛋白F一抗 * 0.2ml Magnesium aceta, trahydra
結(jié)核分支桿菌PCR檢測試劑盒規(guī)格 嗜性粒細(xì)胞陽離子蛋白抗體Leucodin別名: 分子式: C15H18O3性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
E1A樣分化抑制因子3抗體8α-(2-Methylacryloyloxy)hirsutinolide 13-O-aceta別名: 分子式: C21H26O8性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
骨骼肌烯化酶抗體8α-(2-Methylacryloyloxy)-1-O-methylhirsutinolide 13-O-aceta別名: 分子式: C22H28O8性狀: Powder純度: 96.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
真核翻譯起始因子2C1抗體Germacrone 4,5-epoxide別名: 分子式: C15H22O2性狀: Cryst.純度: 96.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
磷化eIF4E結(jié)合蛋白抗體Chloramultilide D別名: 分子式: C35H40O11性狀: Powder純度: 97.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
附睪蛋白酶抑制蛋白trans-Norprosin C別名: 分子式: C13H16O3性狀: Oil純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
內(nèi)皮素B受體抗體Oxyphyllenone A別名: 分子式: C12H18O3性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
大腸桿菌脂多糖抗體Norprosin B別名: 分子式: C13H16O2性狀: Powder純度: 98.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。