產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱:偶發(fā)分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書
英文名稱:Mycobacterium fortuitumPCR
編號:HE31245-R
類別:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。?
儲需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。
保存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
蔓荊子黃素英文名稱 Handelin分 子 量: 552.66CAS NO.: 62687-22-3純 度: ≥98%分子式: C32H40O8性狀: 白色粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實驗等熔點:溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機溶劑;提取來源: 野菊花藥理藥效: 野菊花內(nèi)酯具有清熱解毒,消腫,降壓的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測方法: HPLC貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項:
芒柄花黃素英文名稱 L-Lysinamide,2-methylalanyl-L-histidyl-3-(2-naphthalenyl)-D-alanyl-D-phenylalanyl-分 子 量: 711.85296CAS NO.: 170851-70-4純 度: ≥98%分子式: C38H49N9O5性狀:規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實驗等熔點:溶解性:提取來源:藥理藥效:鑒別方法: NMR;Ms檢測方法:貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項:
芒果苷英文名稱 Isoastragaloside Ⅱ分 子 量: 827.01CAS NO.: 86764-11-6純 度: ≥98%分子式: C43H70O15性狀:規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實驗等熔點:溶解性:提取來源:藥理藥效:鑒別方法: NMR;Ms檢測方法:貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項:
莽草酸英文名稱 Bullatine A分 子 量: 343.5CAS NO.: 1354-84-3純 度: ≥98%分子式: C22H33NO2性狀: 白色粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實驗等熔點:溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機溶劑;提取來源: 雪上一枝蒿藥理藥效: 一枝蒿甲素具有祛風(fēng),抗炎,鎮(zhèn)痛的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測方法: PR-HPLC:pH7.3的磷酸鹽緩沖溶液-甲醇(28:72) λ:210 nm(僅供參考)貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項:
毛冬青酸、鐵冬青酸英文名稱 L-Isoleucine分 子 量: 131.17CAS NO.: 73-32-5純 度: ≥98%分子式: C6H13NO2性狀: 白色結(jié)晶粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實驗等熔點:溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機溶劑;提取來源: 川芎,甜菜,裙帶菜Undariapinnatifida藥理藥效: L-異亮氨酸可用作食用香料,用作氨基酸注射液、復(fù)合氨基酸輸液、食品添加劑鑒別方法: NMR;Ms檢測方法: HPLC-ELSD:甲醇:0.2%乙酸水溶液=38:62(僅供參考)貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項:
毛萼結(jié)甲英文名稱 Icarisid I分 子 量: 530.52CAS NO.: 56725-99-6純 度: ≥98%分子式: C27H30O11性狀: 黃色結(jié)晶粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實驗等熔點:溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機溶劑;提取來源: 羊藿藥理藥效: 羊藿次苷I具有改善心血管系統(tǒng)功能、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌、增強免疫力的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測方法: HPLC貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項:
毛鉤藤堿英文名稱 Isobavachin分 子 量: 324.37CAS NO.: 31524-62-6純 度: ≥98%分子式: C20H20O4性狀:規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實驗等熔點:溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機溶劑;提取來源:藥理藥效: 異補骨脂二氫黃酮具有補腎納氣,抗腫瘤的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測方法: HPLC:乙腈:水 = 30:70 檢測波長:250nm(僅供參考)貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項:
毛蘭素英文名稱 Oxysophoridine分 子 量: 264.36CAS NO.: 54809-74-4純 度: ≥98%分子式: C15H24N2O2性狀:規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實驗等熔點:溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機溶劑;提取來源: 苦豆子,洋槐藥理藥效: 氧化槐定堿具有鎮(zhèn)痛、抗炎,抗癌,抗心律失常的作用鑒別方法: NMR;Ms檢測方法: RP-HPLC:0.01 mol.L-1磷酸鹽緩沖溶液(pH8.5)-甲醇(78∶22) 檢測波長:220nm貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項:
毛兩面針?biāo)赜⑽拿Q Brandioside分 子 量: 812.76502CAS NO.: 133393-81-4純 度: ≥98%分子式: C37H48O20性狀:規(guī)格: 20mg/50mg/1g,可按客戶需求包裝!用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實驗等熔點:溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機溶劑;提取來源: 廣東蜘蛛藥理藥效:鑒別方法: NMR;Ms檢測方法: HPLC貯存條件: 低溫冷藏,避光,密封,干燥注意事項:
偶發(fā)分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書Cefoperazone 頭孢哌酮別名: CefobidCAS: 62893-19-0分子量: 348.05儲存條件: RT
3,4-二磷酸磷脂酰肌醇 英文名稱: PI(3,4P)P2 Mass ELISA 貨期: 3-5Weeks分子量: 90.51儲存條件: 2-8℃
Parthenolide 小白菊內(nèi)酯別名: (-)-ParthenolideCAS: 20554-84-1貨期: 2-3天其它:
注意:
1.本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請Imiquimod 咪喹莫特別名: Aldara;R 837;ZyclaraCAS: 99011-02-6分子量: 429.9儲存條件: -20℃
Sildenafil 別名: Revatio;UK-92480;ViagraCAS: 139755-83-2分子量: 84.08儲存條件: 密封保存。
Danthron 1,8-二羥基蒽醌別名: Dantron;Chrysazin;1,8-DihydroxyanthraquinoneCAS: 117-10-2分子量: 506.08儲存條件: RT,避光
Biotinylated Anti-PtdIns(4,5)P2英文名稱: Biotinylated Anti-PtdIns(4,5)P2貨期: 3-5Weeks分子式: C10H13N2O14P3Na3分子量: 547
Griseofulvin 灰黃霉素別名: Amudane;Grifulvin V;Gris-PEGCAS: 126-07-8分子量: 273.11儲存條件: -20℃
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。