產(chǎn)品名稱(chēng):暗黑鏈霉菌
貨號(hào):YS-01J12370
拉丁文: Streptomyces│atratus
分離基物: 土壤
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: 0012
生長(zhǎng)條件: 28℃
存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
暗黑鏈霉菌菌種傳代 | Streptomyces│atratus | YS-01J12370 |
公司產(chǎn)品僅用于科研培養(yǎng)及打管說(shuō)明:
1、安瓿瓶開(kāi)封:用浸過(guò)75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后,延遲期較長(zhǎng),需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開(kāi)的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高,營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng),適用于霉菌、酵母菌、放線(xiàn)菌及需氧細(xì)菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線(xiàn)菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多,有些可添加保護(hù)劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
豬心型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP3/FABP11/MDGI)磷酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體
豬心鈉肽(ANP)?;o酶A脫氫酶長(zhǎng)鏈抗體
豬心肌特異性肌鈣蛋白T(c)分裂周期蛋白5抗體
豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)β淀粉樣肽/Aβ42抗體
豬酰基輔酶A去飽和酶(SCD)ADCK4蛋白抗體
豬纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)抑癌蛋白AIMP3抗體
豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)相關(guān)蛋白AKAP抗體
豬色素C氧化酶(COX)蛋白激酶A錨定蛋白6抗體
豬色素c還原酶(CCR)肺α/β水解酶蛋白1抗體
豬間粘附分子3(ICAM-3/CD50)水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白13抗體
豬間粘附分子2(ICAM-2)水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白14B抗體
豬戊糖素(PE)水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白15抗體
豬瘟抗體肺α/β水解酶蛋白3抗體
豬瘟抗體(IgM)三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白F亞基3抗體
豬瘟抗體(IgG)三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白A亞基5抗體
暗黑鏈霉菌菌種傳代枯草芽孢桿菌氨基糖苷類(lèi)磷酸結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 Azacitidine (5-Azacytidine) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
牛邊緣無(wú)漿體(獨(dú)山株)唾液酸糖蛋白受體1抗體 Azelastine HCl 質(zhì)量規(guī)格:純度>98%,BR,可用于培養(yǎng)
麥芽糖假絲酵母芳香基硫酸酯酶F抗體 Azelastine HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
首爾鏈霉菌A激酶錨定蛋白5抗體 Azithromycin 質(zhì)量規(guī)格:945-1030 ug /mg,二水物
異常漢遜酵母小腦脊髓共濟(jì)失調(diào)蛋白3抗體 Azithromycin 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定
空泡單胞菌ASTE1蛋白抗體 Aztreonam 質(zhì)量規(guī)格:> 95%,BR
都柏林沙門(mén)氏菌磷酸化自噬相關(guān)蛋白4B抗體 Aztreonam 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品
畢赤酵母屬微絲相關(guān)蛋白1抗體 Baccatin III 質(zhì)量規(guī)格:純度> 98%,BR,可用于培養(yǎng)
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線(xiàn)分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過(guò)分區(qū)劃線(xiàn)稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線(xiàn)分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過(guò)程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱(chēng)取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。