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      上海研生生化試劑有限公司

      當(dāng)前位置:上海研生生化試劑有限公司>>定量PCR試劑盒>>熒光定量PCR試劑盒>> 50次駱駝痘病毒探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒

      駱駝痘病毒探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒

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      產(chǎn)品型號(hào)50次

      品牌

      廠商性質(zhì)代理商

      所在地上海市

      更新時(shí)間:2020-11-25 22:48:40瀏覽次數(shù):750次

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      駱駝痘病毒探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

      熒光定量PCR試劑盒技術(shù):
      產(chǎn)品僅用于科研本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過(guò)將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分,并將兩個(gè)部分通過(guò)側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。
      客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

       產(chǎn)品名稱

      駱駝痘病毒探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒

       英文名稱

       Camel Pox Virus(CPV

       貨號(hào)

       YSP96491

      樣品RNA的抽提:
      ①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
      ②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
      ④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。
      ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
      ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
      2 RNA質(zhì)量檢測(cè)
      1)紫外吸收法測(cè)定
      先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
      ① 濃度測(cè)定
      A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計(jì)算公式為:A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 g/ml。
      實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
      一、試劑準(zhǔn)備
      1. DNA模板
      2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
      3.10×PCR Buffer
      4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
      5.Taq酶
      二、操作步驟
      1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
          10×PCR buffer             5μl
            dNTP mixl                 4μl
            引物1(10pM)               2μl
            引物2(10PM)              2μ
            Taq酶(2U/μl)            1μl
            DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
            加ddH2O至               50 μl
         視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
      2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
      3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
      4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)
      三、注意事項(xiàng)
      1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
      2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
      3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
      甲基紅鈉鹽(ACS reagent,95 %)FRMD6 (D8X3R) Rabbit mAb氟-酸

      間甲基紅MLL1 (D2M7U) Rabbit mAb (Amino-rminal Antigen)環(huán)基萘啶羧酸

      紫脲酸銨(IND)PTPN22 (D6D1H) Rabbit mAb1,6-己酸鹽

      紫脲酸銨(ACS)VCAM-1 Antibody (Rodent Specific)氨基-5-溴-2-氟嘧啶

      甲基紫,龍膽紫Delta FosB (D3S8R) Rabbit mAb2-氨基-氟

      間酚CBX8 (D2O8C) Rabbit mAb2,二甲氧基酸

      硝氮黃Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb三(2-甲氧基基)膦

      中性紅Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb5-溴噻吩-2-甲酸乙酯

      橙黃ⅣRet (D3D8R) Rabbit mAb2,5-二甲基-2,5-己二

      橙黃ⅠRet (E1N9A) Rabbit mAb (Flow Preferred)鄰氨基-N,N-二甲酰

      鄰二酚紫Akt (E17K Mutant Specific) (D1T7P) Rabbit mAb5-溴-甲基吲哚

      N-基鄰氨基甲酸(釩試劑)TofacitinibL-基酸甲酯

      1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚(AR,≥98%)Tyrphostin AG-490氨基-2,5-二氯酚

      1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚(AR,90.0%)Anti-rabbit IgG (H+L), Biotinylad Antibody3,4,5-*氧基芐

      藍(lán)VFAnti-mouse IgG (H+L), Biotinylad Antibody三氟磺酰

      酚酞(IND)YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)N-BOC-脒三基膦

      (2-吡啶偶氮)間二酚(AR)TXNIP (D5F3E) Rabbit mAb1,二溴-2,5-二甲氧基

      (2-吡啶偶氮)間二酚(98%)Phospho-Sin1 (Thr86) (D4U9L) Rabbit mAb二乙氨基酮酸
      駱駝痘病毒探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒單純皰疹病毒Ⅱ型抗體IgM(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒API5  凋亡抑制因子5抗體100 ul

      單純皰疹病毒Ⅱ型抗體IgG(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒IASPP  腫瘤細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個(gè)成員抗體100 ul

      單純皰疹病毒Ⅰ型(HSVⅠ)抗體(IgM)ELISA試劑盒Iba1  離子鈣接頭蛋白抗體100 ul

      單純皰疹病毒Ⅰ型(HSVⅠ)抗體(IgG)ELISA試劑盒ICAD/DFF-45 Beta  Caspase激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑抗體100 ul

      單純皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗體(IgM)ELISA試劑盒ICOS/CD278  誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子CD278抗體100 ul

      單純皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗體(IgG)ELISA試劑盒IDE  胰島素降解酶抗體100 ul

      單氧化酶(MAO)ELISA試劑盒IDE  胰島素降解酶抗體100 ul

      帶3蛋白(Band3)ELISA試劑盒influenza A virus nucleoproin(Flu-A)  流感病毒A核蛋白單克隆抗體20 ul

      大皰性類天皰瘡抗體(BP)ELISA試劑盒influenza B virus nucleoproin  流感B核蛋白單克隆抗體100 ul

       

      豬鏈球菌2型探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒

      豬鏈球菌2型探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),

      嗉囊食通蟲探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒

      嗉囊食通蟲探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)

      嗜熱鏈球菌探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒

      嗜熱鏈球菌探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫

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