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      上海研生生化試劑有限公司

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      植物根系活力試劑盒規(guī)格

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      具體成交價以合同協(xié)議為準

      產品型號

      品牌

      廠商性質代理商

      所在地上海市

      更新時間:2022-01-21 14:51:52瀏覽次數(shù):1188次

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      產品規(guī)格 48樣、96樣、 檢測方法 可見分光光度法、微板法
      貨號 GOY-016347
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      產品名稱:植物根系活力試劑盒規(guī)格

      規(guī)格:48樣、96樣、

      貨號:GOY-016347

      檢測方法:可見分光光度法、微板法

      產品分類:氧化應激系列

      公司產品僅用于科研貯存溫度:28℃。

      本試劑盒保質期:6個月

      圖片1.png 

      【實驗前溶液配制】

      配液1、將2X濃縮復溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復

      溶液+1份去離子水)用于樣本的復溶。

      配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19

      稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量

      配制洗滌液。

      配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1

      濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。

      【所用儀器、試劑】

             :微孔板酶標儀450nm/630nm、旋轉蒸發(fā)儀/氮氣吹干裝

      置、均質器、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g )

      微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl

                 :乙腈、中性氧化鋁


      3.png

       

      測定步驟:

      1、 酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至450nm。

      2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水149稀釋。

      3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml0.1ml的比例混勻配制)

      4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。

      5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)

      選擇抗凝的注意點:

      、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

      、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

      、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.40.5ml血漿);

      、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

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      操作步驟:

      實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

      1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

      2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

      3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

      4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

      5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

      6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

      7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

      8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。


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