無(wú)菌棚,無(wú)塵棚,無(wú)菌室
什么是無(wú)菌棚,無(wú)塵棚,無(wú)菌室?
無(wú)菌棚一般是在微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)專辟一個(gè)小房間??梢杂冒宀暮筒AЫㄔ臁C娣e不宜過(guò)大,約4—5平方米即可,高2.5米左右。無(wú)菌棚外要設(shè)一個(gè)緩沖間,緩沖間的門和無(wú)菌棚的門不要朝向同一方向,以免氣流帶進(jìn)雜菌。無(wú)菌棚和緩沖間都必須密閉。室內(nèi)裝備的換氣設(shè)備必須有空氣過(guò)濾裝置。
一、無(wú)菌棚,無(wú)塵棚,無(wú)菌室標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)程與驗(yàn)收規(guī)范:
1.目的
本規(guī)程旨在為無(wú)菌操作及無(wú)菌室的保護(hù)提供一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)程。
2、適用范圍、生測(cè)實(shí)驗(yàn)室。
3、責(zé)任者、QC主管生測(cè)員。
4、定義無(wú)
5、安全注意事項(xiàng);
嚴(yán)格無(wú)菌操作,防止微生物污染;操作人員進(jìn)入無(wú)菌室應(yīng)先關(guān)掉紫外燈。
二、規(guī)程:
1.無(wú)菌室應(yīng)設(shè)有無(wú)菌操作間和緩沖間,無(wú)菌操作間潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級(jí),室內(nèi)溫度保持在20-24℃,濕度保持在45-60%。超凈臺(tái)潔凈度應(yīng)達(dá)到100級(jí)。
2.無(wú)菌室應(yīng)保持清潔,嚴(yán)禁堆放雜物,以防污染。
3.嚴(yán)防一切滅菌器材和培養(yǎng)基污染,已污染者應(yīng)停止使用。
4.無(wú)菌室應(yīng)備有工作濃度的消毒液,如5%的甲酚溶液,70%的....1%的新潔爾滅溶液,等等。
5.無(wú)菌室應(yīng)定期用適宜的消毒液滅菌清潔,以保證無(wú)菌室的潔凈度符合要求。
6.需要帶入無(wú)菌室使用的儀器,器械,平皿等一切物品,均應(yīng)包扎嚴(yán)密,并應(yīng)經(jīng)過(guò)適宜的方法滅菌。
7.工作人員進(jìn)入無(wú)菌室前,必須用肥皂或消毒液洗手消毒,然后在緩沖間更換工作服,鞋,帽子,口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭雙手),方可進(jìn)入無(wú)菌室進(jìn)行操作。
8.無(wú)菌室使用前必須打開(kāi)無(wú)菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘以上,并且同時(shí)打開(kāi)超凈臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)。操作完畢,應(yīng)及時(shí)清理無(wú)菌室,再用紫外燈輻照滅菌20分鐘。
9.供試品在檢查前,應(yīng)保持外包裝完整,不得開(kāi)啟,以防污染。檢查前,用70%的酒精棉球消毒外表面。
10.每次操作過(guò)程中,均應(yīng)做陰性對(duì)照,以檢查無(wú)菌操作的可靠性。
11.吸取菌液時(shí),必須用吸耳球吸取,切勿直接用口接觸吸管。
12.接種針每次使用前后,必須通過(guò)火焰灼燒滅菌,待冷卻后,方可接種培養(yǎng)物。
13.帶有菌液的吸管,試管,培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來(lái)蘇爾溶液的消毒桶內(nèi)消毒,24小時(shí)后取出沖洗。
14.如有菌液灑在桌上或地上,應(yīng)立即用5%石碳酸溶液或3%的來(lái)蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘,再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時(shí),應(yīng)立即脫去,高壓蒸汽滅菌后洗滌。
15.凡帶有活菌的物品,必須經(jīng)消毒后,才能在水下沖洗,嚴(yán)禁污染下水道。
16.無(wú)菌室應(yīng)每月檢查菌落數(shù)。在 超凈工作臺(tái)開(kāi)啟的狀態(tài)下,取內(nèi)徑90mm的無(wú)菌培養(yǎng)皿若干,無(wú)菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約15ml,放至凝固后,倒置于30~35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí),證明無(wú)菌后,取平板3~5個(gè),分別放置工作位置的左中右等處,開(kāi)蓋暴露30分鐘后,倒置于30~35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí),取出檢查。
100級(jí)潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過(guò)1個(gè)菌落,10000級(jí) 潔凈室平均不得超過(guò)3個(gè)菌落。如超過(guò)限度,應(yīng)對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行*消毒,直至重復(fù)檢查合乎要求為止。
三、技術(shù)指導(dǎo)說(shuō)明:
在獲得了無(wú)菌環(huán)境和無(wú)菌材料后,我們還要保持無(wú)菌狀態(tài),才能對(duì)某種特定的已知微生物進(jìn)行研究或利用它們的功能,否則外界的各種微生物很容易混入。
外界不相干的微生物混入的現(xiàn)象,在微生物學(xué)中我們叫做污染雜菌。防止污染是微生物學(xué)工作中十分關(guān)鍵的技術(shù)。
一方面是*滅菌,另一方面防止污染,是無(wú)菌技術(shù)的兩個(gè)方面。另外,我們還要防止所研究的微生物,特別是致病微生物或經(jīng)過(guò)基因工程改造了的本來(lái)自然界不存在的微生物從我們的實(shí)驗(yàn)容器中逃逸到外界環(huán)境中去。為了這些目的,在微生物學(xué)中,有許多措施。
無(wú)菌室內(nèi)的地面、墻壁必須平整,不易藏污納垢,便于清洗。工作臺(tái)的臺(tái)面應(yīng)該處于水平狀態(tài)。無(wú)菌室和緩沖間都裝有紫外線燈,無(wú)菌室的紫外線燈距離工作臺(tái)面1 米。工作人員進(jìn)入無(wú)菌室應(yīng)穿滅過(guò)菌的服裝,戴帽子。
當(dāng)前無(wú)菌室多存在于微生物工廠,一般實(shí)驗(yàn)室則使用超凈臺(tái)。超凈臺(tái)其主要功能是利用空氣層流裝置排除工作臺(tái)面上部包括微生物在內(nèi)的各種微小塵埃。
通過(guò)電動(dòng)裝置使空氣通過(guò)高效過(guò)濾器具后進(jìn)入工作臺(tái)面,使臺(tái)面始終保持在流動(dòng)無(wú)菌空氣控制之下。
而且在接近外部的一方有一道高速流動(dòng)的氣簾防止外部帶菌空氣進(jìn)入。
在條件較困難的地方,也可以用木制無(wú)菌箱代替超凈臺(tái)。無(wú)菌箱結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,便于移動(dòng),箱正面開(kāi)有兩個(gè)洞,不操作時(shí)用推拉式小門擋住,操作時(shí)可以將雙臂伸進(jìn)去。
正面上部裝有玻璃,便于在內(nèi)部操作,箱內(nèi)部裝有紫外線燈,從側(cè)面小門可以放進(jìn)去器具和菌種等。
四、應(yīng)用:
無(wú)菌室一個(gè)應(yīng)用行業(yè)非常廣泛的基礎(chǔ)性配套產(chǎn)業(yè),目前在電子信息、半導(dǎo)體、光電子、精密制造、醫(yī)藥衛(wèi)生、生物工程、航天、汽車噴涂等眾多行業(yè)均有應(yīng)用,并根據(jù)行業(yè)的精密與無(wú)塵要求,等級(jí)差別也較大。
目前級(jí)別zui高的當(dāng)屬航天的倉(cāng),基本是屬于1級(jí),屬于特殊領(lǐng)域,面積相對(duì)較小。
另外對(duì)級(jí)別要求較高的是生化實(shí)驗(yàn)室和高精納米材料生產(chǎn)車間,物聯(lián)網(wǎng)芯片的發(fā)展將是未來(lái)需求的一大方向。
隨著電子元器件向微小化方向發(fā)展,液晶面板已經(jīng)升級(jí)至第八代,行業(yè)需求非常巨大。
五、的要求:
1.工作室應(yīng)矮小、平整,面積只需4米2左右,高2.2—2.3米,內(nèi)部裝修應(yīng)平整、光滑,無(wú)凹凸不平或棱角等,四壁及屋頂應(yīng)用不透水之材質(zhì),便于擦洗及殺菌
2.室內(nèi)采光面積大,從室外應(yīng)能看到室內(nèi)情況。
3.為保證無(wú)菌室的潔凈,無(wú)菌室周圍需設(shè)緩沖走廊,走廊旁再設(shè)緩沖間,其面積可小于無(wú)菌室。
4.無(wú)菌室、緩沖走廊及緩沖間均設(shè)有日光燈及供消毒空氣用紫外燈,殺菌紫外燈離工作臺(tái)以1米為宜 ,其電源開(kāi)關(guān)均應(yīng)設(shè)在室外。
5.無(wú)菌室與緩沖間進(jìn)出口應(yīng)設(shè)拉門,門與窗平齊,門縫要封緊,兩門應(yīng)錯(cuò)開(kāi),以免空氣對(duì)流造成污染。
六、的使用與管理:
(1) 無(wú)菌室應(yīng)保持清潔整齊,室內(nèi)僅存放必須的檢驗(yàn)用具如酒精燈、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接種環(huán)、玻璃鉛筆等。不要放與檢測(cè)無(wú)關(guān)的物品
(2) 室內(nèi)檢驗(yàn)用具及凳桌等保持固定位置,不隨便移動(dòng)。
(3) 每2—3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作臺(tái)、門、窗、桌、椅及地面,然后用3%石炭酸水溶液噴霧消毒空氣,zui后紫外燈殺菌半小時(shí)
(4)定期檢查室內(nèi)空氣無(wú)菌狀況,細(xì)菌數(shù)應(yīng)控制在10個(gè)以下,發(fā)現(xiàn)不符合要求時(shí),應(yīng)立即*消毒滅菌。無(wú)菌室無(wú)菌程度的測(cè)定方法:取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養(yǎng)基平板各3個(gè)(平板直徑均9厘米),置無(wú)菌室各工作位置上,開(kāi)蓋曝露半小時(shí),然后倒置進(jìn)行培養(yǎng),測(cè)細(xì)菌總數(shù)應(yīng)置37℃溫箱培養(yǎng)48小時(shí);測(cè)霉菌數(shù)則應(yīng)置27℃溫箱培養(yǎng)5天。細(xì)菌`霉菌總數(shù)均不得超過(guò)10個(gè)為 。
(5)無(wú)菌室殺菌前,應(yīng)將所有物品置于操作之部位(待檢物例外),然后打開(kāi)紫外燈殺菌30分鐘,時(shí)間一到,關(guān)閉紫外燈待用
(6)進(jìn)入無(wú)菌室前,必須于緩沖間更換消毒過(guò)的工作服、工作帽及工作鞋。
(7)操作應(yīng)嚴(yán)格按照無(wú)菌操作規(guī)定進(jìn)行,操作中少說(shuō)話,不喧嘩,以保持環(huán)境的無(wú)菌狀態(tài)。
器材及場(chǎng)所的滅菌消毒。
微生物檢驗(yàn)用器材及場(chǎng)所必須進(jìn)行滅菌或消毒處理,不同的對(duì)象采用不同的處理方法;
1.高壓蒸汽滅菌: 工作服、口罩、稀釋液等,置高壓殺菌鍋內(nèi),一般采用121℃滅菌半小時(shí),當(dāng)然不同的培養(yǎng)基有不同的要求,應(yīng)分別處理。
2.火焰滅菌: 接種針、接種環(huán)等可直接火焰滅菌
3.高溫干燥滅菌: 各種玻璃器皿、注射器、吸管等,置于燥箱中160℃滅菌2小時(shí)
4.一 般消毒: 無(wú)菌室內(nèi)的凳、工作臺(tái)、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無(wú)法進(jìn)行滅菌,必須用其他方法進(jìn)行消毒處理,采用2%石炭酸或來(lái)...溶液擦拭消毒,工作人員的手也用此法進(jìn)行消毒。
5. 空氣的消毒: 開(kāi)啟紫外燈照射30—60分鐘 即可。
七、操作要領(lǐng):
準(zhǔn)備工作
1.*行無(wú)菌室空間的消毒,開(kāi)啟紫外燈30—60分鐘
2.檢驗(yàn)用的有關(guān)器材, 搬入無(wú)菌室前必須分別進(jìn)會(huì)滅菌消毒
3.操作人員必須將手清洗消毒,穿戴好無(wú)菌工作衣、帽和鞋,才能進(jìn)入無(wú)菌室
4.進(jìn)入無(wú)菌室后再一次消毒手部,然后才進(jìn)行檢驗(yàn)操作
八、操作過(guò)程注意事項(xiàng):
1.動(dòng)作要輕,不能太快,以免攪動(dòng)空氣增加污染;玻璃器皿也應(yīng)輕取輕放,以免破損污染環(huán)境
2.操作應(yīng)在近火焰區(qū)進(jìn)行。
3.接種環(huán)、接種針等金屬器材使用前后均需灼燒,灼燒時(shí)先通過(guò)內(nèi)焰,使殘物烘干后再灼燒滅菌
4.使用吸管時(shí),切勿用嘴直接吸、吹吸管,而必須用洗耳球操作。
5.觀察平板時(shí)不好 開(kāi)蓋,如欲沾取菌落檢查時(shí),必需靠近火焰區(qū)操作,平皿蓋也不能 大開(kāi),而是上下蓋適當(dāng)開(kāi)縫。
6.進(jìn)行可疑致病菌涂片染色時(shí),應(yīng)使用夾子夾持玻片,切勿用手 直接拿玻片,以免造成污染,用過(guò)的玻片也應(yīng)置于消毒液中浸泡消毒,然后再洗滌。
7.工作結(jié)束,收拾好工作臺(tái)上的樣品及器材,zui后用消毒液擦拭工作臺(tái)。
九、微粒污染控制:
無(wú)菌室外源性污染源,主要是通過(guò)門和無(wú)菌室內(nèi)外通道侵入的室外空氣。因此無(wú)菌室的布置通常都采用按照工藝操作的關(guān)鍵程度,潔凈度的高低由里往外逐級(jí)減弱,抵御室外污染空氣的侵入。
同時(shí)為物料和人員進(jìn)出無(wú)菌室設(shè)置相應(yīng)的控制措施,例如物料的氣閘、人員的無(wú)菌更衣系統(tǒng)以及室內(nèi)廢棄物傳遞出來(lái)的通道等。無(wú)菌室內(nèi)的污染源,主要來(lái)自于無(wú)菌室內(nèi)必要的操作人員和部分工藝設(shè)備,通常無(wú)菌室內(nèi)操作人員的四周區(qū)域是潔凈度zui差的區(qū)域,也是無(wú)菌技術(shù)中重要的控制內(nèi)容。
在無(wú)菌室的設(shè)計(jì)中,通過(guò)向室內(nèi)輸送定量的潔凈空氣,稀釋置換室內(nèi)已使用過(guò)的潔凈空氣,將臟空氣排出室外,使室內(nèi)的空氣潔凈度等級(jí)達(dá)到100000級(jí)、10000級(jí)或局部達(dá)到100級(jí)的空氣潔凈度要求,室內(nèi)已使用過(guò)的臟空氣由清潔的空氣取代,在空氣的稀釋置換設(shè)計(jì)中,臟空氣與清潔空氣持續(xù)地混合稀釋,逐漸減少房間中的微粒負(fù)荷。
置換稀釋設(shè)計(jì)對(duì)潔凈區(qū)域的空氣凈化系統(tǒng)的設(shè)計(jì)有很高的要求,而且必須考慮無(wú)菌室的布局和操作方式,還要為關(guān)鍵區(qū)間提供合適的局部單向空氣流動(dòng)保護(hù),需要注意與空氣凈化系統(tǒng)供應(yīng)的空氣一樣,滿布高效空氣過(guò)濾器的單向流動(dòng)罩產(chǎn)生的空氣流動(dòng)也可以置換稀釋房間中空氣傳播的微粒,這種空氣流動(dòng)會(huì)增加有效的房間空氣交換率,并有助于污染空氣置換稀釋。
無(wú)菌室內(nèi)空氣置換稀釋污染系統(tǒng)設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)注意:潔凈空氣供應(yīng)的體積應(yīng)足以抵消空間中不斷產(chǎn)生的微粒數(shù),以此維持工藝操作的基本條件要求;室內(nèi)空間供應(yīng)的空氣應(yīng)比普通維持條件下空氣更清潔;要求混合供應(yīng)的清潔空氣應(yīng)滿足去除房間內(nèi)含有微粒的空氣,以達(dá)到室內(nèi)空氣置換稀釋的作用。
無(wú)菌室內(nèi)天花板應(yīng)與風(fēng)管、管道、燈具、風(fēng)口等的安裝脫開(kāi),光滑、無(wú)裂縫,易于清洗。無(wú)菌室的門窗材料應(yīng)選擇耐受性好、自然變形小、制造誤差小、容易控制縫隙、氣密性好的材料,采用雙層中空玻璃結(jié)構(gòu)的雙層窗,既節(jié)約空間、又節(jié)約能源,還可以避免玻璃窗結(jié)露引起霉變,造成污染;窗盡量采用大玻璃,這樣可減少積灰點(diǎn),又有利于清潔工作。
梓凈產(chǎn)品質(zhì)量保證:
>>我司出產(chǎn)的"梓凈"牌空氣凈化設(shè)備及空氣過(guò)濾器產(chǎn)品已獲國(guó)內(nèi)、多項(xiàng)產(chǎn)品認(rèn)證;
>>為滿足客戶對(duì)潔凈室的高品質(zhì)要求,我司生產(chǎn)出廠的每一臺(tái)空氣凈化設(shè)備都經(jīng)過(guò)我司質(zhì)檢員的嚴(yán)格檢查,符合產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方可出廠;空氣過(guò)濾器都在標(biāo)準(zhǔn)萬(wàn)級(jí)無(wú)塵車間內(nèi)生產(chǎn)、檢測(cè)。
>>產(chǎn)品交付驗(yàn)收完畢后,我司將對(duì)貴司及所訂購(gòu)產(chǎn)品建立獨(dú)立的檔案,以便與我司*的為貴司提供優(yōu)質(zhì)、及時(shí)的服務(wù)。
>>產(chǎn)品包裝:木箱或紙箱包裝;
>>發(fā)貨方式:貨運(yùn);
>>交貨時(shí)間:合同簽訂后我司收到貨款之日起5個(gè)工作日內(nèi)完成生產(chǎn),3個(gè)工作日內(nèi)到貨;
服務(wù)宗旨:
>>公司出產(chǎn)的"梓凈"牌空氣凈化設(shè)備及空氣過(guò)濾器可提供*的;
>>故障受理:省外48小時(shí),省內(nèi)24小時(shí);
無(wú)菌棚,無(wú)塵棚,無(wú)菌可按客戶要求規(guī)格尺寸訂作。