H661-GFP熒光標(biāo)記細(xì)胞株胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
主要功能:
(1)血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2)表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3)與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
變化:
(1)主動(dòng)脈硬化。
(2)主動(dòng)脈瘤
(3)主動(dòng)脈鈣化。
基本特性:
(1)組織來源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
(2)鑒定:肌動(dòng)蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3)原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5)肌動(dòng)蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗(Abbioscience公司),然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡(Leica公司)下觀察圖像并拍照。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | H661-GFP |
價(jià)格 | 來電可享受優(yōu)惠 |
公司耐藥細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
英文名稱Humaissue-typePlasminogenActivator(t-PA)人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 雙(2-甲酰苯基)醚(>98.0%(GC)) Bis(2-formylphenyl) Ether 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
英文名稱humaM-Ab人抗甲狀腺微粒體抗體(TM-Ab)規(guī)格:96T/48T 1,3-雙(4-氨苯氧基)苯(>98.0%(GC)(T)) 1,3-Bis(4-aminophenoxy)benzene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
英文名稱Human1,25-dihydroxyvitaminD3人1,25-二羥基維生素D3(1,25(OH)2D3)規(guī)格:96T/48T 4-氨基-4'-氯二苯醚(>97.0%(GC)(T)) 4-Amino-4'-chlorodiphenyl Ether 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T)
英文名稱Human14-3-3protein人14-3-3蛋白(14-3-3pro)規(guī)格:96T/48T 4-氯-4'-羥基二苯醚(>95.0%(GC)) 4-Chloro-4'-hydroxydiphenyl Ether 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
英文名稱Human15-lipoxygenase人15-脂加氧酶(15-LO)規(guī)格:96T/48T 4,4'-二硝基二苯醚(>99.0%(GC)) 4,4'-Dinitrodiphenyl Ether 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)
英文名稱Human17-Hydroxycoicosteroids人17-羥皮質(zhì)類(17-OHCS)規(guī)格:96T/48T 3,4'-二氨基二苯醚(>97.0%(GC)(T)) 3,4'-Diaminodiphenyl Ether 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T)
英文名稱Human17-KS人17-同皮質(zhì)類(17-KS)規(guī)格:96T/48T 1,4-二苯氧基苯(>98.0%(GC)) 1,4-Diphenoxybenzene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
英文名稱Human25(OH)D3人25羥維生素D3(25(OH)D3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 4,4'-二羧基二苯醚(>98.0%(GC)(T)) 4,4'-Dicarboxydiphenyl Ether 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
英文名稱Human25-HVD人25-羥基維生素D(25-HVD)規(guī)格:96T/48T 4,4'-二羥基二苯醚(>98.0%(GC)) 4,4'-Dihydroxydiphenyl Ether 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
英文名稱Human-3人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素3(-3)規(guī)格:96T/48T 2,2'-二羥基二苯醚(>98.0%(GC)) 2,2'-Dihydroxydiphenyl Ether 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
RhoA鳥苷酸酶活性分析試劑盒6 波尼松龍-d6 Prednisolone-d6 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
RabbitcoagulationfactorⅡ,FⅡELISA試劑盒兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 波尼松龍21-半琥珀酸鈉鹽 Prednisolone 21-hemisuccinate sodium salt 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒 ,英文名: ACTH ELISA Kit 6α-甲基波尼松龍21-醋酸 6α-Methylprednisolone 21-Acetate 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit 96T/48T 喹硫平富馬酸鹽標(biāo)記-d8 Quetiapine Hemifumarate Labeled d8 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
人β細(xì)胞素(BTC)免疫試劑盒 Human beta cellulin,BTC ELISA Kit 喹硫平二聚體雜質(zhì) Quetiapine Dimer Impurity 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
英文名稱Mousehemeoxygenase-2ELISAKit小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)規(guī)格:96T/48T 羥基喹硫平雜質(zhì) Quetiapine Hydroxy Impurity 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
RhoB鳥苷酸酶活性分析試劑盒6 N-氧基喹硫平 Quetiapine N-Oxide 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
rabbitCollageypeⅠ,ColⅠELISA試劑盒兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 喹硫平磺酸鹽 Quetiapine Sulfoxide 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 7-芐氧基-N-des{[2-(2-羥基)乙氧基]乙基} 喹硫平 7-Benzyloxy-N-des{[2-(2-hydroxy)ethoxy]ethyl} Quetiapine 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
Rat coisol (Coisol) ELISA Kit 大鼠皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA試劑盒 喹硫平 quetiapine 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
4-氯-4'-羥基二苯醚(>95.0%(GC)) 4-Chloro-4'-hydroxydiphenyl Ether 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 英文名稱Human14-3-3proteinELISAKit人14-3-3蛋白(14-3-3pro)規(guī)格:96T/48T
4,4'-二硝基二苯醚(>99.0%(GC)) 4,4'-Dinitrodiphenyl Ether 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 英文名稱Human15-lipoxygenaseELISAKit人15-脂加氧酶(15-LO)規(guī)格:96T/48T
3,4'-二氨基二苯醚(>97.0%(GC)(T)) 3,4'-Diaminodiphenyl Ether 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T) 英文名稱Human17-HydroxycoicosteroidsELISAKIT人17-羥皮質(zhì)類(17-OHCS)規(guī)格:96T/48T
1,4-二苯氧基苯(>98.0%(GC)) 1,4-Diphenoxybenzene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱Human17-KSELISAKIT人17-同皮質(zhì)類(17-KS)規(guī)格:96T/48T
4,4'-二羧基二苯醚(>98.0%(GC)(T)) 4,4'-Dicarboxydiphenyl Ether 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 英文名稱Human25(OH)D3ELISAKit人25羥維生素D3(25(OH)D3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
4,4'-二羥基二苯醚(>98.0%(GC)) 4,4'-Dihydroxydiphenyl Ether 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱Human25-HVDELISAKit人25-羥基維生素D(25-HVD)規(guī)格:96T/48T
2,2'-二羥基二苯醚(>98.0%(GC)) 2,2'-Dihydroxydiphenyl Ether 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱Human-3ELISAKit人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素3(-3)規(guī)格:96T/48T
4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚(>98.0%(GC)) 4-Benzoyl 4'-Methyldiphenyl Sulfide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱Human-4ELISAKit人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素4(-4)規(guī)格:96T/48T
4-叔丁基二苯硫醚(>98.0%(GC)) 4-tert-Butyldiphenyl Sulfide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱Human6-keto-prostaglandinelisakit人6-同-前列腺素(6-keto-prostaglandin)規(guī)格:96T/48T
雙(4-羥苯基)硫醚(>98.0%(GC)) Bis(4-hydroxyphenyl) Sulfide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱Human8-hydroxy-2-deoxyguanosineELISAKit人8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)規(guī)格:96T/48T
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。