腐生菌測(cè)試瓶/腐生菌細(xì)菌測(cè)試瓶 TGB 型號(hào):ZW115TGB

一、產(chǎn)品品種：
細(xì)菌總數(shù)測(cè)試瓶（BT）
大腸菌群測(cè)試瓶（FCB）
腐生菌測(cè)試瓶（TGB）
鐵細(xì)菌測(cè)試瓶（FEB）
硫酸鹽還原菌測(cè)試瓶（SRB）
二、方法原理：
采用絕跡稀釋法，即用*將待測(cè)定的水樣逐級(jí)注入到測(cè)試瓶中，進(jìn)行接種稀釋后，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)，根據(jù)測(cè)試瓶陽性反應(yīng)和稀釋的倍數(shù)，計(jì)算出水樣中細(xì)菌量總數(shù)。
三、操作步驟：
① 將同一品種測(cè)試瓶排成一組，依次編上序號(hào)（按照估計(jì)的細(xì)菌量確定測(cè)試瓶個(gè)數(shù)，建議參考數(shù)值為：X×100的細(xì)菌量用３個(gè)測(cè)試瓶、X×101的細(xì)菌量用４個(gè)測(cè)試瓶、X×102的細(xì)菌量用５個(gè)測(cè)試瓶、X×103的細(xì)菌量用６個(gè)測(cè)試瓶）。
　　　　做二個(gè)平行樣重復(fù)試驗(yàn)時(shí)應(yīng)排為二組；做三個(gè)平行樣重復(fù)試驗(yàn)時(shí)應(yīng)排為三組。
② 用*取1ml代表性水樣（采樣方法依據(jù)GB/T12997-1991、GB/T12998-1991、GB/T12999-1991、GB/T14581-1993的規(guī)定進(jìn)行）注入1號(hào)瓶?jī)?nèi)稀釋，充分振搖，待用（平行樣亦按此操作，下同）；

1
③ 用另一支*從1號(hào)瓶?jī)?nèi)抽取0.5 ml經(jīng)充分振搖后的水樣注入2號(hào)瓶?jī)?nèi)稀釋，充分振搖，待用；
④ 再用一支*從2號(hào)瓶中內(nèi)抽取0.5ml經(jīng)充分振搖后的水樣注入3號(hào)瓶?jī)?nèi)稀釋，充分振搖，待用；
⑤ 依次類推稀釋直到zui后一瓶為止，待用。
⑥ 將上述所有稀釋過的測(cè)試瓶放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，按表１進(jìn)行細(xì)菌生長(zhǎng)的鑒別。

表１　　細(xì) 菌 生 長(zhǎng) 的 鑒 別 方 法
細(xì)菌瓶品種 規(guī)格型號(hào) 培養(yǎng)溫度 培養(yǎng) 時(shí)間 陽性反應(yīng)特征
細(xì)菌總數(shù)測(cè)試瓶 KBC—BT 37±2℃ 24±2h 瓶中液體由紅變黃、或液體混濁、或液體表面出現(xiàn)菌膜、或液體底部出現(xiàn)沉淀。
大腸菌群測(cè)試瓶 總大腸菌群 KBC—TCB 37±2℃
24±2h
瓶中液體由紫紅變黃
糞大腸菌群 KBC—TCB 44±2℃
腐生菌測(cè)試瓶 KBC—TGB 現(xiàn)場(chǎng)采樣溫度±3℃ 24±2h 瓶中液體由紅變黃
鐵細(xì)菌測(cè)試瓶 KBC—FEB 24 瓶中液體棕色褪去，生成棕色或黑色沉淀
硫酸鹽還原菌測(cè)試瓶 KBC—SRB 7H 瓶中無色液體變黑或生成黑色沉淀
2
四、細(xì)菌量計(jì)量：
１．在一定溫度下培養(yǎng)一定時(shí)間后，按瓶號(hào)列出稀釋梯度，并根據(jù)細(xì)菌瓶陽性反應(yīng)的個(gè)數(shù)，確定生長(zhǎng)指標(biāo)和級(jí)數(shù)（參見附錄及示例）．
２．根據(jù)生長(zhǎng)指標(biāo)查表２或表３，確定細(xì)菌量基數(shù)并乘以級(jí)數(shù)，即為細(xì)菌量總數(shù)。
　　　　　　　　細(xì)菌量總數(shù)＝細(xì)菌量基數(shù)×級(jí)數(shù)
二組平行樣重復(fù)試驗(yàn)查表２
　　三組平行樣重復(fù)試驗(yàn)查表３
3、細(xì)菌量總數(shù)結(jié)果報(bào)告示例見表４
五、注意事項(xiàng)
1、測(cè)試瓶中若有白色沉淀為過量營養(yǎng)成份，屬正?，F(xiàn)象，不影響測(cè)試。
2、常溫條件下，測(cè)試瓶?jī)?chǔ)存有效期為一年。
3、測(cè)試瓶經(jīng)稀釋后，一定要用力振搖1~2分鐘，以保證測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確性。


表２ 二 次 重 復(fù) 細(xì) 菌 量 基 數(shù) 表
生 長(zhǎng)
指 標(biāo) 細(xì)菌量 基數(shù) (個(gè)/ml) 生 長(zhǎng)
指 標(biāo) 細(xì)菌量 基數(shù) (個(gè)/ml) 生 長(zhǎng)
指 標(biāo) 細(xì)菌量基數(shù) (個(gè)/ml) 生 長(zhǎng)
指 標(biāo) 細(xì)菌量 基數(shù) (個(gè)/ml) 生 長(zhǎng)
指 標(biāo) 細(xì)菌量基數(shù) (個(gè)/ml)
000 0.0 020 0.9 111 2.0 201 5.0 220 25.0
001 0.5 100 0.6 120 2.0 210 6.0 221 70.0
010 0.5 101 1.2 121 3.0 211 13.0 222 110.0
011 0.9 110 1.3 200 2.5 212 20.0







3
例2、 
①√ ②√ ③√ ④ ⑤ 
①／√ ②／√ ③／√ ④／ ⑤／ 
①＂√ ②＂√ ③＂ ④＂√ ⑤＂ 
+ + + - -
+ + + - -
+ + - + -
3 2 1 

即 



則此生長(zhǎng)指標(biāo)為321，級(jí)數(shù)為1。查三次重復(fù)計(jì)數(shù)表。321對(duì)應(yīng)的細(xì)菌量為15個(gè)/ml。此系列報(bào)告結(jié)果為：15×101=150個(gè)/ml。
例3、
① ②√ ③ ④ ⑤ 
①／√ ②／√ ③／√ ④／ ⑤／ 
①＂ ②＂ ③＂ ④＂ ⑤＂ 
- + - - -
+ + + - -
- - - - -
1 2 1

即 




則此生長(zhǎng)指標(biāo)為121，級(jí)數(shù)<0。查三次重復(fù)計(jì)數(shù)表。121對(duì)應(yīng)的細(xì)菌量為1.5個(gè)/ml。此系列報(bào)告結(jié)果為：≤1.5×100既≤1.5個(gè)/ml。
例4、 ①√ ②√ ③√ ④√ ⑤√ 
①／√ ②／√ ③／√ ④／√ ⑤／√ 即 
①＂√ ②＂√ ③＂√ ④＂ ⑤＂ 
8 
附錄
一、 生長(zhǎng)指標(biāo)的確定原則．
１． 全部呈陽性反應(yīng)的zui后一列平行樣應(yīng)為生長(zhǎng)指標(biāo)的*位數(shù)．
２． 同一平行樣，有Ｘ個(gè)陽性反應(yīng)瓶，生長(zhǎng)指標(biāo)即為Ｘ．

二、級(jí)數(shù)的確定原則
１．全部呈陽性反應(yīng)的zui后一列平行樣的瓶號(hào)數(shù)減去１，即為級(jí)數(shù)ｎ，以１０ｎ表示．
　　２．１號(hào)瓶的２或３個(gè)平行樣未全部發(fā)生陽性反應(yīng)時(shí)，級(jí)數(shù)為０，即為１００


示例１
① ② ③ ④ ⑤
+ - - - -
+ + - - -
+ + + - -
生長(zhǎng)指標(biāo)：?。场　。病。?/span>

級(jí)　　數(shù)：?。保埃啊　。á伲保剑埃?/span>

　示例２

① ② ③ ④ ⑤
+ + + - -
+ + + - -
+ + + + +
生長(zhǎng)指標(biāo)：　　　　?。场　。薄。?/span>
　級(jí)　　數(shù)：?。保埃病。á郏保剑玻?/span>






5
示例３　

　　　　　?、佟　、凇　、邸　、堋　、?/span>
　　　　　　+　　　+　　-　　　+　　-
　　　　　　+　　　+　　+　　　-　　-
生長(zhǎng)指標(biāo)：　　　?。病　。薄　。?/span>
級(jí)　　數(shù)：?。保埃薄。á冢保剑保?/span>

示例４　

　　　　?、?② ③ ④ ⑤
　　　　　- + - - -
　　　　　+　 -　 +　 -　 -
生長(zhǎng)指標(biāo)：１　 １?。?/span>
級(jí)　　數(shù)：?。保埃啊?/span>




















6
細(xì)菌測(cè)試瓶測(cè)試方法及結(jié)果報(bào)告示例
例、做三個(gè)平行樣重復(fù)試驗(yàn)，每個(gè)樣稀釋5個(gè)梯度：
① ② ③ ④ ⑤ 
①／ ②／ ③／ ④／ ⑤／
①＂ ②＂ ③＂ ④＂ ⑤＂
即分別在① ①／①＂號(hào)瓶中注入0.5ml水樣，搖勻后取出0.5ml再分別注入② ②／②＂號(hào)瓶中；搖勻后取出0.5ml再分別注入到③ ③／③＂號(hào)瓶中，依次類推，直至⑤ ⑤／⑤＂號(hào)瓶。
在恒溫下放置一定時(shí)間后（大腸菌群37℃，24小時(shí)）觀察測(cè)試瓶陽性（變色）反應(yīng)個(gè)數(shù)。
例1、（打√者為陽性反應(yīng)---以+表示） 
①√ ② ③ ④ ⑤ 
①／√ ②／√ ③／√ ④／ ⑤／ 
①＂√ ②＂√ ③＂ ④＂ ⑤＂ 
+ - - - -
+ + + - -
+ + - - -
3 2 1

即



則此生長(zhǎng)指標(biāo)為321，級(jí)數(shù)為0。查三次重復(fù)計(jì)數(shù)表。321對(duì)應(yīng)的細(xì)菌量為15個(gè)/ml。此系列報(bào)告結(jié)果為：15×100=15個(gè)/ml。






7
陽性反應(yīng)，報(bào)告結(jié)果應(yīng)注明“≥”，（如例5）。此情況下說明細(xì)菌量大，應(yīng)增加測(cè)試瓶的個(gè)數(shù)，以求得較準(zhǔn)確的結(jié)果。
⑤ 測(cè)試瓶注入水樣（稀釋）后應(yīng)用力振搖，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性；逐級(jí)稀釋水樣時(shí)，應(yīng)更換*，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。