產(chǎn)品概述

原理
Amaxa^®Nucleofector^®技術(shù)是 Lonza(原Amaxa)公司的創(chuàng)新技術(shù)，它綜合應(yīng)用傳統(tǒng)的電穿孔技術(shù)及細(xì)胞特異性細(xì)胞核轉(zhuǎn)染液，通過調(diào)整優(yōu)化的電轉(zhuǎn)參數(shù)（內(nèi)存轉(zhuǎn)染程序），直接把外源基因?qū)朐?xì)胞及細(xì)胞系的細(xì)胞漿和細(xì)胞核中。
 
 
外源基因直接導(dǎo)入核內(nèi)
Normal human dermal fibroblasts –neonatal were nucleofected with 2.5 μg TMR-labeled plasmid DNA encoding eGFP. Fixation of cells was performed after 2 hours with 3.5 % PFA. TMR label is shown in (A), GFP fluorescence in (B), DAPI nuclear staining in (C) and a merge of all three fluorescent labels in (D).

 
 
 
泛細(xì)胞類型的高效轉(zhuǎn)染 Human H9 ES cells preserve pluripotency post Nucleofection. H9 cells were transfected by Nucleofection with the pmaxGFP Vector. (Left) Cells analyzed after 24 hours show expression of GFP (green) as well as of the pluri potency markers SSEA4 (red) and Oct4 (purple). The blue signals refer to nuclear staining by DAPI. (Right) The percentage of double- positive cells (GFP/SSEA) was analyzed by flow cytometry. (Data kindly provided by Jennifer Moore, Rutgers University, Piscataway, USA.)
 
     
 
 

產(chǎn)品介紹：
細(xì)胞核轉(zhuǎn)染儀是2001年上市的以單孔電轉(zhuǎn)杯為基礎(chǔ)的細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)，適用于難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系和原代細(xì)胞的高效轉(zhuǎn)染，同時(shí)也適用于細(xì)菌轉(zhuǎn)化。自上市以來，由于其的技術(shù)，高效的轉(zhuǎn)染，穩(wěn)定的性能，可靠的質(zhì)量，經(jīng)過多年的驗(yàn)證和認(rèn)可，在范圍內(nèi)擁有一批忠實(shí)的使用者。在此期間，廠家也多次改進(jìn)儀器性能，更變儀器型號(hào)，由的I型，到IIN型，到IIs型，至現(xiàn)在的2b型。
 
 
配套轉(zhuǎn)染試劑盒：
- 5種細(xì)胞系轉(zhuǎn)染試劑盒，
- 50多種原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒，
- 1種細(xì)胞細(xì)胞系優(yōu)化轉(zhuǎn)染試劑盒
 
 
 
 
操作步驟：
整個(gè)操作過程只需四步，非常簡(jiǎn)單、高效。
第1步：處理細(xì)胞，精確計(jì)數(shù)
第2步：混合DNA、轉(zhuǎn)染液，重懸細(xì)胞，加入轉(zhuǎn)染杯
第3步：將轉(zhuǎn)染杯放入轉(zhuǎn)染儀，按鍵選擇相應(yīng)程序，按"start"鍵開始轉(zhuǎn)染，10秒鐘左右
第4步：取出細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)、
 
技術(shù)參數(shù)：
1、原理：綜合應(yīng)用電穿孔技術(shù)和細(xì)胞特異性細(xì)胞核轉(zhuǎn)染液，可直接將外源基因?qū)爰?xì)胞核中。
 
  2、轉(zhuǎn)染程序
       2.1 針對(duì)不同的細(xì)胞類型，內(nèi)存有優(yōu)化好的轉(zhuǎn)染程序；
2.2 內(nèi)存針對(duì)1000多種細(xì)胞類型的優(yōu)化程序；
2.3 隨著細(xì)胞數(shù)據(jù)庫(kù)的不斷增加，轉(zhuǎn)染程序也不斷升級(jí)，可提供免費(fèi)升級(jí)服務(wù)；
2.4 除了內(nèi)存真核細(xì)胞的優(yōu)化程序，還內(nèi)存有細(xì)菌的轉(zhuǎn)化程序。
 
  3、轉(zhuǎn)染液
     3.1 針對(duì)不同的細(xì)胞類型，提供不同的配套試劑盒，包括細(xì)胞系試劑盒和原代細(xì)胞試劑盒；
3.2 含有細(xì)胞特異性細(xì)胞核轉(zhuǎn)染液，輔助細(xì)胞核轉(zhuǎn)染儀，已達(dá)到高效的轉(zhuǎn)染效率和高的細(xì)胞存活率；
3.3 含有陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒PmaxGFP
 
  4、細(xì)胞轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù)庫(kù)
 含針對(duì)1000多種細(xì)胞的轉(zhuǎn)染完整操作數(shù)據(jù)庫(kù)，包括細(xì)胞處理、轉(zhuǎn)染效率、細(xì)胞轉(zhuǎn)染后存活率等各方面驗(yàn)證方案。
 
5、應(yīng)用
5.1 能對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞，特別是原代細(xì)胞和懸浮細(xì)胞，如神經(jīng)細(xì)胞，干細(xì)胞，淋巴細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞進(jìn)行快速、高效率的轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染過程為非病毒介導(dǎo)，不依賴細(xì)胞分裂直接將外源基因?qū)爰?xì)胞核的過程。
5.2 可以高效率轉(zhuǎn)染DNA、RNA及siRNA等寡核苷酸進(jìn)入原代細(xì)胞及難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系。
 
6、其他特點(diǎn)
6.1體積小，且輕便，攜帶方便，可放于無菌細(xì)胞室中；
6.2 易于操作，自動(dòng)化操作，快速便捷；
 
物理參數(shù)：

1、電轉(zhuǎn)參數(shù)	電流	20 VA/fuse 0.4A
	電壓	230VAC+10%/-20% ；或110VAC+10%/-20%
	電擊時(shí)間長(zhǎng)短	根據(jù)選用程序定時(shí)間長(zhǎng)短
2、工作頻率	50-60Hz，自我調(diào)節(jié)
3、體積重量	30×23×11cm
	2.8kg

 
 

	基礎(chǔ)平臺(tái)	高級(jí)平臺(tái)	96孔平臺(tái)	高通量平臺(tái)
設(shè)備名稱	Nucleofector 2b 單孔細(xì)胞核轉(zhuǎn)染儀	4D-Nucleofector system 4D細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)	Nucleofector 96-well shuttle 96孔細(xì)胞核轉(zhuǎn)染儀	HT Nucleofector system 高通量細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)
設(shè)備圖片
通量	低通量（1孔）	低-中通量（1-16孔）	低-中通量（1-96孔）	高通量（384孔）
體積	100μl	20μl+100μl	20μl	20μl
電極材料	鋁離子	導(dǎo)電聚合物	導(dǎo)電聚合物	導(dǎo)電聚合物
小細(xì)胞數(shù)(20μl)	--	2 x 104 --- 1 x 106	2 x 104 --- 1 x 106	2 x 104 --- 1 x 106
大細(xì)胞數(shù)(100μl)	2 x 105 --- 2 x 107	2 x 105 --- 2 x 107	--	--
原位轉(zhuǎn)染 (20μl電轉(zhuǎn)板條)	--	√	√	--
與96孔shuttle兼容性	IIS版本兼容 IIb和IIN不兼容	√	--	--