測定化妝品中二十一種磺胺的液相色譜儀
二十一種磺胺物質(zhì)是我國《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》貴的的禁用物質(zhì),部分作為化妝品生產(chǎn)原料即添加組分添加到化妝品中。如果技術(shù)上無法避免禁用物質(zhì)作為雜志帶入化妝品時,測化妝品成品應(yīng)符合《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》對化妝品的一般要求,即在正常及合理的可預(yù)見的使用條件下,不得對人體健康產(chǎn)生危害。
目前我國尚未規(guī)定這些物質(zhì)的值,本標(biāo)準(zhǔn)的定義,僅對化妝品中測定這些物質(zhì)提供檢測方法。
化妝品中二十一種磺胺的測定高效液相色譜法
1 范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了化妝品中二十一種磺胺的測定高效液相色譜法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于化妝品中二十一種磺胺的測定。
2 規(guī)范性科研文件
下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用貳成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。
GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和實驗方法
3 原理
試樣經(jīng)溶劑提取,離心過濾后,用高效液相色譜測定,外標(biāo)法定量,液相色譜-質(zhì)譜確認(rèn)。
4 試劑和材料
除非另有說明,所有試劑均分析純,水為GB/T 6682貴的的一級水。
4.1 甲醇:色譜純。
4.2 四氫呋喃:色譜純。
4.3 氫氧化鈉溶液(0.1mol/L):準(zhǔn)確稱取4g氫氧化鈉于1L容量瓶中,用水溶解并定容至刻度,混勻后備用。
4.4 甲酸溶液(0.1%):準(zhǔn)確量取1ml甲酸于1L容量瓶中,用水定容至刻度,混勻后備用。
4.5 甲醇水溶液:準(zhǔn)確量取50ml甲醇和50ml水,混勻后備用。
4.6 磺胺胍、磺胺、、、、、、磺胺甲基吡啶、磺胺二甲噁唑、、磺胺間二甲嘧啶、磺胺唑噁啉、磺胺硝苯、磺胺甲噻二唑、、琥珀酰、、磺胺甲基異噁唑、、磺胺領(lǐng)苯二甲氧嘧啶、磺胺二甲異噁唑標(biāo)準(zhǔn)品:純度大于97%。
4.7 二十一中磺胺標(biāo)準(zhǔn)儲備液:準(zhǔn)確稱取每種磺胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(4.6)各100mg,分別置于100ml棕色容量瓶中,用甲醇水溶液(4.5)溶解并定容至刻度,搖勻,配置成濃度分別為1000ug/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液,于4℃避光保存,可使用三個月
注磺胺噁唑標(biāo)準(zhǔn)儲備液配置時,可加入數(shù)滴氫氧化鈉溶液(4.3)輔助溶解。
4.8 二十一種磺胺的混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液:分別準(zhǔn)確移取二十一種磺胺標(biāo)準(zhǔn)儲備液歌4ml余100ml棕色容量瓶中,用甲醇水溶液(4.5)定容至刻度,該溶液中二十一中磺胺的濃度均為40ug/mL。
5 儀器和設(shè)備
5.1 高效液相色譜儀(HPLC STI500二元梯度):配有紫外檢測器或二極管陣列檢測器。
5.2 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜(LC-MS/MS)儀:配有電噴霧離子源(ESI).
5.3 分析天平:感量為0.0001g和0.001g。
5.4 離心機(jī):轉(zhuǎn)速不低于5000r/min。
5.5 超聲波水浴。
5.6 具塞比色管:10ml。
5.7 具塞塑料離心管:10ml。
5.8 微孔濾膜:0.45um,有機(jī)相。
6 分析步驟
6.1 樣品處理
6.1.1 膏霜、乳業(yè)、水劑、散粉、香波類樣品
稱取1g(精確至0.001g)試樣于10Ml具塞比色管中,加入5ml甲醇,再加水至10ml,超聲提取20min。取部分溶液轉(zhuǎn)移至10Ml具塞比色管中,以不低于5000r/min離心15min,上清液經(jīng)0.45um微孔濾膜過濾,過濾液作為待測樣液。
注:如離心難以得上清液可加適量氯化鈉破乳。
6.1.2 唇膏類樣品
稱取1g(精確至0.001g)試樣于10Ml具塞比色管中,加入2ml四氫呋喃,超聲提取10Min,再加水至10Ml,超聲提取10min。取部分溶液轉(zhuǎn)移至10Ml具塞比色管中,以不低于5000r/min離心15min,上清液經(jīng)0.45um微孔濾膜過濾,過濾液作為待測樣液。
6.2 測定條件
高效液相色譜測定條件如下:
A,色譜柱:Vertex C18,5um,250mm×4.6mm(內(nèi)徑)。
B, 流動相見表1.
C, 流速:1.0ml/min。
D,柱溫:32℃。
E, 波長:268nm。
F, 進(jìn)樣量:20ul。
表1流動相
步驟 | 時間/min | 甲醇溶液(0.1%)/% | 甲醇/% |
0 | 0.00 | 92 | 8 |
1 | 7.00 | 84 | 16 |
2 | 13.00 | 78 | 22 |
3 | 18.00 | 75 | 25 |
4 | 27.00 | 75 | 25 |
5 | 29.00 | 45 | 55 |
6 | 40.00 | 5 | 95 |
7 | 42.00 | 92 | 8 |
6.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
用甲醇水溶液(4.5)將二十一種磺胺混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液逐級稀釋得到的濃度為0.1ug/ml、0.5ug/ml、1ug/ml、5ug/ml、10ug/ml、20ug/ml的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液,按6.2的測定條件濃度由低到高進(jìn)樣測定,以峰面積-濃度作圖,得到標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程。
二十一種磺胺標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖見A.1
6.4 測定
按6.2的測定條件對待測樣液進(jìn)行測定,用外標(biāo)法定量。待測樣液中磺胺的響應(yīng)值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi),超過線性范圍測應(yīng)稀釋后再進(jìn)樣分析。必要時,陽性樣品需要用液相色譜-質(zhì)譜確認(rèn)試驗(參見附錄B)
6.5 空白試驗
除不稱取樣品外,均按上述測定條件和步驟進(jìn)行。
7結(jié)果計算
結(jié)果按式(1)計算,計算結(jié)果保留2為小數(shù)(計算結(jié)果應(yīng)扣除空白值):
Wi=1000×Ci×V/m…..(1)
Wi—試樣中被測磺胺的含量,單位為毫克每千克(mg/kg)
Ci—從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線上查出的樣液中被測磺胺的濃度,單位為ug/ml
V—樣液最終定容體積,單位L
m—試樣的質(zhì)量,單位g
8 檢出限和定量限
本標(biāo)準(zhǔn)的檢出限和定量:磺胺胍、磺胺、、、、、、磺胺甲基吡啶、磺胺二甲噁唑、、磺胺間二甲嘧啶、磺胺唑噁啉、磺胺硝苯的檢出限為0.2mg/kg,定量限為0.6mg/kg;磺胺甲噻二唑、、琥珀酰、、磺胺甲基異噁唑、、磺胺領(lǐng)苯二甲氧嘧啶、磺胺二甲異噁唑的檢出限為0.4mg/kg,定量限為1.2mg/kg。
9 回收率
在天津濃度為0.2mg/kg-40mg/kg濃度范圍內(nèi),回收率在85%-110%之間,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10%。
10 允許差
在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的差值不應(yīng)超過算術(shù)平均值的10%。
附錄B,詳細(xì)請電話咨詢:
關(guān)鍵詞:二十一種磺胺,高效液相色譜法,化妝品新規(guī),GB/T 24800.6-2009