規(guī) 格: | 型 號:210 | 數(shù) 量: |
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光波導(dǎo)光模(optical waveguide lightmode spectroscopy,OWLS) 技術(shù)在集成光學(xué)領(lǐng)域中是一個相對較新的產(chǎn)物。作為一項(xiàng)研究發(fā)生在固體與液體界面的過程的技術(shù),它使得檢測靈敏度、獲得的信息量及系統(tǒng)易用性等方面發(fā)展到一個更高的水平,甚至高于一些已經(jīng)有深遠(yuǎn)影響的技術(shù)成就,如橢圓偏光法,表面等離子體共振(SPR).
每種方法都有一定的優(yōu)點(diǎn):橢圓偏光法能用于透明的或不透明的基底;SPR 能夠?qū)嶋H上也必須與貴金屬基底一起使用。但是,在生物學(xué)應(yīng)用中,OWLS 不僅有較高的固有靈敏度,而且便利性和通用性都好于其他常見非標(biāo)記檢測方法.
OWLS檢測原理是通過平面波導(dǎo)的基本原理,OWLS 技術(shù)使用一個光柵來激發(fā)平面波導(dǎo)的導(dǎo)向模式。入射的平面偏振激光從光柵衍射,開始在波導(dǎo)里面通過內(nèi)部的反射傳播。不斷測量入射角的變化,不需要任何標(biāo)記過程就可以直接在光柵上在線監(jiān)測高分子的吸附質(zhì)量。這種方法對于波導(dǎo)表面幾百納米內(nèi)的范圍是很敏感的(探測極限小于1 ng/cm2 )。此外,達(dá)到秒級的測量時間分辨率可以進(jìn)行原位的、實(shí)時的吸附動力學(xué)研究,這項(xiàng)技術(shù)相對于SPR 傳感器的優(yōu)勢在于它有兩個參數(shù):吸附層的厚度(dA)和反射率(nA)可以通過模式方程中的兩個測量過的參數(shù)同時確定
OWLS 的檢測操作十分簡便。與其他光學(xué)檢測方法類似,它的流程主要分成以下三個步驟:
引入緩沖液沖洗表面,以計算傳感器的光學(xué)參數(shù),如波導(dǎo)層的折射率、厚度、激光初始入射角等。這個過程需要一定的時間以使得這些光學(xué)參數(shù)變得穩(wěn)定,在OWLS 檢測結(jié)果上表現(xiàn)為基線的水平化過程。分子識別(吸附)過程。引入樣品溶液,在一定的樣品流速和溫度下,進(jìn)行核酸的雜交或者蛋白質(zhì)的特異性吸附。通過檢測傳感器光學(xué)參數(shù)的變化進(jìn)而實(shí)時監(jiān)測樣品結(jié)合動力學(xué)的變化。再次以緩沖液沖洗,洗去未結(jié)合牢固的核酸或蛋白質(zhì),以穩(wěn)定定量檢測的結(jié)果。
OWLS與其他光學(xué)非標(biāo)記檢測法之比較
1.高靈敏度
2.不存在背景噪聲
3.定量理論計算
4.實(shí)時檢測和原位檢測
OWLS的主要應(yīng)用領(lǐng)域:
生物大分子的相互作用
磷脂雙分子層(細(xì)胞膜)的行為
環(huán)境及環(huán)境污染監(jiān)測
生物材料的安全性測試
藥物篩選毒理學(xué)研究