服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Aspergillus nidulansPCR |
貨號(hào) | HE30625-R |
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
?
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
抗可提取核抗原抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:粘度(1%,25℃) ≥500 mpa.s 包裝;5g
抗可溶性肝抗原抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR 包裝;50mg
抗菌肽LL-37 elisa試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5MG
抗菌肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>500U/mg,BR 包裝;25g
抗菌肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí) 包裝;5g
抗巨細(xì)胞病毒試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5ml
抗巨細(xì)胞病毒試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BP2009,BR 包裝;25g
抗巨噬細(xì)胞抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g
抗酒石酸酸性磷酸酶5b試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:≥99%,BR 包裝;100ml
抗抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25ml
抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;500ml
抗角蛋白抗體elisa試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:含量≥99.0%(HPLC) 包裝;1g
抗膠原蛋白抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99.0%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;250mg
抗甲狀腺微粒體抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC),BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;100ml
抗甲狀腺球蛋白抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP33,BR 包裝;25ml
抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5ml
抗甲型肝炎病毒抗體IgM試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 包裝;100g
構(gòu)巢曲霉PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)Bacillusmethylotrophicus 中文名稱:甲基營(yíng)養(yǎng)型芽胞桿菌種屬:Bacillusmethylotrophicus分離基物:稻根際土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:分類學(xué)研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0904;(R2A);酵母粉0.50g,月示蛋白胨0.50g,,酪蛋白解物0.50g,葡萄糖0.50g,可溶性淀粉0.50g,丙酮酸鈉0.30g,KH2PO40.30g,MgSO4×7H2O0.05g,瓊脂15g。蒸餾1000mL。終pH7.2,在加入瓊脂前用結(jié)晶KH2PO4或K2HPO4調(diào)pH,加入瓊脂后加熱溶解,并于121℃濕熱滅菌15min。生長(zhǎng)條件:30℃;好氧存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Myrotheciumverrucaria 中文名稱:疣孢漆斑菌種屬:Myrotheciumverrucaria分離基物:空氣提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014;馬鈴薯、葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基:(PDA);馬鈴薯提取液1.0L,葡萄糖20.0g,瓊脂15.0g,pH自然。[注]馬鈴薯提取液生長(zhǎng)條件:25℃;好氧存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Bacillussubtilis 中文名稱:枯草芽胞桿菌種屬:Bacillussubtilis提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:蒸汽滅菌指示菌,可用于低于121℃蒸汽滅菌生物指示劑制備。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂;蛋白胨5.0g,牛肉浸取物3.0g,NaCl5.0g,瓊脂15.0g,蒸餾1.0L,pH7.0。[注]培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mgMnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。121℃,15分鐘滅菌。生長(zhǎng)條件:30℃,好氧存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Fusariumgraminearum 中文名稱:禾谷鐮孢種屬:Fusariumgraminearum提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:植物生防拮抗試驗(yàn)供試病原菌。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014;馬鈴薯、葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基:(PDA);馬鈴薯提取液1.0L,葡萄糖20.0g,瓊脂15.0g,pH自然。[注]馬鈴薯提取液生長(zhǎng)條件:30℃;好氧存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Exserohilumturcicum 中文名稱:土耳其凸臍孢菌種屬:Exserohilumturcicum提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:植物生防拮抗試驗(yàn)供試病原菌。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014;馬鈴薯、葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基:(PDA);馬鈴薯提取液1.0L,葡萄糖20.0g,瓊脂15.0g,pH自然。[注]馬鈴薯提取液生長(zhǎng)條件:30℃;好氧存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:99%
PseudomonasCocovenenansSubsp 中文名稱:酵米面假單胞菌(酵米面黃桿菌)種屬:PseudomonasCocovenenansSubsp安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:37℃ 純度:99%
Auricularia sp. 中文名稱:木耳(斜面)種屬:Auricularia sp.提供形式:試管斜面安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:食用培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長(zhǎng)條件:25-28℃,好氧 純度:99%
Grifola frondosa(Fr.)S.F.Gray 中文名稱:灰樹(shù)花(斜面)種屬:Grifola frondosa(Fr.)S.F.Gray提供形式:斜面安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:食用和藥用培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然,121℃,15min。生長(zhǎng)條件:26℃,7-10天 純度:≥99%