淺談液相色譜儀應(yīng)用方案的建立方法

    液相色譜儀檢測的靈敏性較高，被廣泛運(yùn)用于食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域，其主要檢測項(xiàng)目是食品和藥物工業(yè)生產(chǎn)過程中的藥品殘留，減少對人體的傷害。相關(guān)檢測、科研部門在建立藥品中特定物質(zhì)檢測或含量測定的應(yīng)用方案時(shí)，須按照藥典收載的相關(guān)藥品分析方法的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。建立完整的液相色譜儀檢測方案需涵蓋檢測儀器、檢測試劑、樣品的制備、液相色譜儀檢測條件、檢測結(jié)果以及結(jié)果分析方法。

在建立方法時(shí)，選擇儀器配置以及試劑應(yīng)當(dāng)注意以下事項(xiàng)：①液相色譜柱填料*十八烷基鍵合硅膠；②檢測器*UV檢測器；?流動(dòng)相*甲醇-水系統(tǒng)，應(yīng)盡可能少用含有緩沖液的流動(dòng)相，如為堿性藥物，流動(dòng)相的pH值應(yīng)為7~8；如為酸性藥物，流動(dòng)相的pH值應(yīng)為3~4；④內(nèi)標(biāo)物應(yīng)*易得到的純度較高的化學(xué)試劑或?qū)φ掌?，?yīng)與待測物質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)相似，理化性質(zhì)接近，峰的響應(yīng)值相當(dāng)，以及分離度應(yīng)大于1.5。

待檢測樣品溶液的配置可直接由樣品原料經(jīng)攪碎、溶解、過濾、提取而來，提取出來的樣品溶劑必須經(jīng)過氮吹儀結(jié)晶提純處理后，再經(jīng)溶劑過濾器過濾方可進(jìn)入儀器進(jìn)行檢測分析。

檢測過程中，須按照色譜檢測條件操作，且要精準(zhǔn)控制液相色譜儀各部件的試驗(yàn)狀況，包括進(jìn)樣器、泵的壓力調(diào)整，流動(dòng)相的流速控制，色譜柱溫箱、檢測器、進(jìn)樣口的溫度控制等都須嚴(yán)格執(zhí)行。任何檢測條件的異動(dòng)都會(huì)影響到檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

    檢測結(jié)果的分析，即對檢測樣品的定性定量分析，需注意以下事項(xiàng)：若雜質(zhì)峰的響應(yīng)值與主成分峰的響應(yīng)值相差太大，應(yīng)*自身對照法，而不宜選用面積歸一化法；若以內(nèi)標(biāo)法測定含量，應(yīng)考慮內(nèi)標(biāo)物是否含有干擾供試品的雜質(zhì)；如以外標(biāo)法測定含量，對照品與供試品應(yīng)各取樣2份，對照溶液各進(jìn)樣3次，供試品溶液各進(jìn)樣2次，計(jì)算相對標(biāo)準(zhǔn)差（RSD應(yīng)不得大于l.5％）。

    zui后，應(yīng)進(jìn)行zui低檢出量試驗(yàn)，并對同一樣品分析結(jié)果的重現(xiàn)程度、方法的可行性，并作出評價(jià)。

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