"Anti-TGF- Alpha /FITC??熒光素標記轉(zhuǎn)移生長因子–α抗體IgG

標記抗體（一抗）

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多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟：
　　1、制備抗原。 　
　2、選擇實驗動物。
　　3、動物免疫。 　
　4、試取血進行測試，看看是否成功免疫。
　　5、如果成功免疫，殺死實驗動物，采集全部血清。
　　6、純化出抗體。 　
　7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
　　抗體的特異性鑒定 ：
抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力?？贵w的特異性高，它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線，計算各自的結合率，求出各自在 IC50時的濃度，并按下列公式計算交叉反應率。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管，而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時，表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應率近似為 0，即該血清的特異性較好。
多克隆抗體：
定義1：由多個B細胞克隆所產(chǎn)生的抗體，可與不同抗原表位結合且免疫球蛋白類別各異。
所屬學科：免疫學（一級學科）；免疫系統(tǒng)（二級學科）；免疫分子（三級學科）
定義2：對特定抗原所產(chǎn)生的一組免疫球蛋白混合物，每種免疫球蛋白能識別抗原分子上的一個表位。
所屬學科：生物化學與分子生物學（一級學科）；總論（二級學科）
定義3：多種抗原表位刺激機體免疫系統(tǒng)后，機體產(chǎn)生的針對不同抗原表位的混合抗體。
所屬學科：細胞生物學（一級學科）；細胞免疫（二級學科）
按理化性質(zhì)和生物學功能分類：
　　按理化性質(zhì)和生物學功能，可將其分為IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五類。
　　IgM抗體是免疫應答中首先分泌的抗體。它們在與抗原結合后啟動補體的級聯(lián)反應。它們還把入侵者相互連接起來，聚成一堆便于巨噬細胞的吞噬；
　 IgG抗體激活補體，中和多種毒素。IgG持續(xù)的時間長，是*能在母親妊娠期穿過胎盤保護胎兒的抗體。他們還從乳腺分泌進入初乳，使新生兒得到保護；
　　IgA抗體進入身體的黏膜表面，包括呼吸、消化、生殖等管道的黏膜，中和感染因子。還可以通過母乳的初乳把這種抗體輸送到新生兒的消化道黏膜中，是在母乳中含量zui多，zui為重要的一類抗體；
　　IgE抗體的尾部與嗜堿細胞、肥大細胞的細胞膜結合。當抗體與抗原結合后，嗜堿細胞與肥大細胞釋放組織胺一類物質(zhì)促進炎癥的發(fā)展。這也是引發(fā)速發(fā)型過敏反應的抗體；
　　IgD抗體的作用還不太清楚。它們主要出現(xiàn)在成熟的B淋巴細胞表面上，可能與B細胞的分化有關。
（IgD于1995年從人骨髓瘤蛋白中發(fā)現(xiàn)，分子量為175kD，主要由扁桃體、脾等處漿細胞產(chǎn)生，人血清中IgD濃度為3～40μg/ml,不到血清總Ig的1%，在個體發(fā)育中合成較晚。IgD鉸鏈區(qū)很長，且對蛋白酶水解敏感，因此IgD半衰期很短，僅2.8天。血清中IgD確切的免疫功能尚不清楚。在B細胞分化到成熟B細胞階段，除了表達SmIgD，抗原刺激后表現(xiàn)為免疫耐受。成熟B細胞活化后或者活化后或者變成記憶B細胞時，SmIgD逐漸消失。）
單克隆抗體：
　?。╩onoclonal antibody，McAb）克隆選擇學說：淋巴細胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專一性結合的受體，一種細胞帶一種受體，進入機體的抗原選擇性的結合其中的個別淋巴細胞，使之活化，增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細胞群，分泌同樣的抗體。當抗原進入體內(nèi)，在機體中就會誘導出針對不同抗原決定簇的多種抗體，如果要把這些抗體一一分開，用現(xiàn)有的生物化學或物理化學方法是根本辦不到的。1975年科勒（Kohler）和米爾斯坦（Milstein）將小鼠免疫細胞與腫瘤細胞融合，培養(yǎng)出既能迅速生長無限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細胞。從而獲得針對某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體。1995年，Katherine Knight博士在美國芝加哥Loyola大學成功地從轉(zhuǎn)基因兔中獲得了骨髓瘤細胞（Plasmacytoma），開創(chuàng)了兔單克隆抗體技術。與鼠單抗相比，兔單抗具有：首先，兔抗血清通常含有高親和力抗體，可以比鼠抗血清識別更多種類的表位；其次，兔單克隆抗體能夠識別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原；第三，由于兔脾臟較大，可以更多進行的融合試驗，使得高通量篩選融合成為可能。
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