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      小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒

      參  考  價(jià):面議
      具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

      產(chǎn)品型號(hào)KB3784A

      品牌

      廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

      所在地上海市

      更新時(shí)間:2017-07-08 22:57:14瀏覽次數(shù):908次

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      KB3784A
      小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒
      Mouse tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA Kit
      96T/48T
      "小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒

      Mouse tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA Kit


      包裝:96T/48T
      檢測(cè)標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。
      保存:2-8℃,一年。

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      供應(yīng)商:

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      自備材料
      1. 蒸餾水。
      2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
      3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
      操作步驟
      1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
      2. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
      3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
      4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
      5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
      6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
      7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
      8. 取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
      9. 在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
      尿液、胸腹水、腦脊液:
      用無(wú)菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
      @@@細(xì)胞培養(yǎng)上清:
      檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的 成份時(shí),用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀 釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬(wàn) /ml 左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
      試劑盒內(nèi)容及其配制
      試劑盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
      96/48人份酶標(biāo)板 1塊板(96T) 半塊板(48T) 即用型
      塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型
      標(biāo)準(zhǔn)品:800pg/ml 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按說(shuō)明書進(jìn)行稀稀
      空白對(duì)照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
      標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型
      生物素標(biāo)記的抗IFN-γ抗體 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
      親和鏈酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型
      洗滌緩沖液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按說(shuō)明書進(jìn)行稀釋
      底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
      底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
      終止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
      標(biāo)本稀釋液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型
      計(jì)算
      以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
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