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      人凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒

      參  考  價:面議
      具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

      產(chǎn)品型號KB1930A

      品牌

      廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

      所在地上海市

      更新時間:2017-08-01 10:55:18瀏覽次數(shù):521次

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      KB1930A
      人凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒
      Human coagulation factor Ⅻ,FⅫ ELISA Kit
      96T/48T
      "人凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒

      Human coagulation factor Ⅻ,FⅫ ELISA Kit


      包裝:96T/48T
      檢測標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。
      保存:2-8℃,一年。

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      供應(yīng)商:

      本公司是專業(yè)的ELISA試劑盒供應(yīng)商!本公司專業(yè)經(jīng)銷elisa試劑盒、omega試劑盒、抗體、動物血清、標(biāo)準(zhǔn)品等生物試劑,產(chǎn)品質(zhì)量有保證,售后服務(wù)有保障。垂詢!

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      組織標(biāo)本:
      切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的 PBS ,緩沖液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制劑或 50U/ml 的 Aprotinin ( 抑肽酶)。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻 漿充分。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
      血清:
      室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
      @@@血漿:
      應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入 10 %( v/v )抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形 成,應(yīng)再次離心。
      建議使用的實驗方案
      標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mIU/ml)
      A 40 40 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
      B 20 20 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
      C 10 10 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
      D 5.0 5.0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
      E 2.5 2.5 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
      F 1.25 1.25 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
      G 0 0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
      H 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
      操作步驟
      1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
      2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
      3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
      4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
      5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
      6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
      7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
      8. 取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
      9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。
      尿液、胸腹水、腦脊液:
      用無菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
      @@@細(xì)胞培養(yǎng)上清:
      檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的 成份時,用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀 釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達到 100 萬 /ml 左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
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