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      小鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒

      參  考  價:面議
      具體成交價以合同協(xié)議為準

      產品型號KB4259A

      品牌

      廠商性質經銷商

      所在地上海市

      更新時間:2017-07-19 17:44:37瀏覽次數:433次

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      KB4259A
      小鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒
      Mouse Vitamin K1,VK1 ELISA Kit
      96T/48T
      小鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒

      Mouse Vitamin K1,VK1 ELISA Kit


      包裝:96T/48T
      檢測標本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。
      保存:2-8℃,一年。

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      供應商:

      本公司是專業(yè)的ELISA試劑盒供應商!本公司專業(yè)經銷elisa試劑盒、omega試劑盒、抗體、動物血清、標準品等生物試劑,產品質量有保證,售后服務有保障。垂詢!

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      組織標本:
      切割標本后,稱取重量。加入一定量的 PBS ,緩沖液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制劑或 50U/ml 的 Aprotinin ( 抑肽酶)。用手工或勻漿器將標本勻 漿充分。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
      操作步驟
      1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
      2. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
      3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
      4. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
      5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
      6. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
      7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
      8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
      9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。
      尿液、胸腹水、腦脊液:
      用無菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。
      @@@細胞培養(yǎng)上清:
      檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清。檢測細胞內的 成份時,用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀 釋細胞懸液,細胞濃度達到 100 萬 /ml 左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
      安全性
      1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
      2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
      3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
      操作注意事項
      1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
      2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
      3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
      4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
      5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
      6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
      7. 底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
      8. 加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
      9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
      血清:
      室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。
      @@@血漿:
      應根據試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入 10 %( v/v )抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清。如有沉淀形 成,應再次離心。

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