服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Cryptosporidium parvumPCR |
貨號 | HE30867-R |
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
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特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
芴甲氧羰基-N-三苯甲基-D-半胱氨酸/N-Fmoc-N'-三苯甲基- D-半胱氨酸/N-FMOC-S-三苯甲基-D-半胱氨酸/N-芴甲氧羰基-S-三苯甲基-D-半胱氨酸/Fmoc-D-Cys(Trt)-OH 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;25g
芴甲氧羰基-S-乙酰氨甲基-L-半胱氨酸/Na-芴甲氧羰酰基-S-(乙?;?氨甲基)-L-半胱氨酸/FMOC-S-乙酰氨甲基-L-半胱氨酸/Fmoc-Cys(Acm)-OH 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;25g
芴甲氧羰基-N-三苯甲基-L-組氨酸/N-Fmoc-N'-三苯甲基-L-組氨酸/Nα-FMOC-N(IM)-TRITYL-L-組氨酸/N-芴甲氧羰基-N'-三苯甲基-L-組氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-N'-三苯甲基-L-組氨酸/Fmoc-His(Trt)-OH 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;5g
芴甲氧羰?;?N-甲基-L-纈氨酸/Fmoc-N'-甲基-L-纈氨酸/Fmoc-N-Me-Val-OH 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;25g
芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-酪氨酸/Fmoc-O-叔丁基-L-酪氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-叔丁基-L-酪氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-O-叔丁基-L-酪氨酸/Fmoc-Tyr(tBu)-OH 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;5g
芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-蘇氨酸/Fmoc-O-叔丁基-L-蘇氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-叔丁基-L-蘇氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-O-叔丁基-L-蘇氨酸/Fmoc-Thr(tBu)-OH 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;1g
馬尿酰-組氨酰-亮氨酸/N-Hippuryl-His-Leu hydrate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;10g
O-乙酰-L-絲氨酸鹽酸鹽/O-乙酰-L-氫氯化絲氨酸/O-Acetyl-L-serine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR 包裝;50g
N,N'-二琥珀酰亞胺基碳酸酯/N,N'-琥珀酰亞胺基碳酸酯/N,N-琥珀酰氨基碳酸酯/N,N'-碳酸二琥珀酰亞胺基/N-氫氧化琥珀酰亞胺/DSC 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;1g
氨基酸螯合鐵/10% Iron chelate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR 包裝;25g
DL-高半胱氨酸/DL-2-氨基-4-巰基丁酸/DL-類半胱氨酸/DL-巰基丁氨酸/DL-同型半胱氨酸/同型半胱氨酸/升半胱胺酸/2-氨基-4-巰基丁酸/DL-Homocysteine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;5g
N-芴甲氧羰基-N'-(4-甲氧基-2,3,6-*基苯磺?;?-L-精氨酸/N-Fmoc-N'-(4-甲氧基-2,3,6-*基苯磺?;?-L-精氨酸/Na-芴甲氧羰基- Nω-(4-甲氧基-2,3,6-*苯磺酰)-L-精氨酸/Na-芴甲氧羰?;?Nω-(4-甲氧基-2,3,6-*苯磺酰基)-L-精氨酸/Fmoc-Arg(Mtr)-OH 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 包裝;100g
Nα-FMOC-Nω-PBF-L-精氨酸/Fmoc-Pbf-精氨酸/N-芴甲氧羰?;?2,2,4,6,7-五甲基二氫苯并呋喃-5-磺酰-L-精氨酸/Fmoc-保護基精氨酸/芴甲氧羰酰-精氨酸/FMOC-NOMEGA-2,2,4,6,7-五甲基苯并呋喃-5-磺?;?L-精氨酸/Fmoc-Arg(Pbf)-OH 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;25g
FMOC-L-谷氨酸5-叔丁酯/芴甲氧羰基-L-谷氨酸5-叔丁酯/芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-谷氨酸/Fmoc-O-叔丁基-L-谷氨酸/Fmoc-Glu(OtBu)-OH 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;5g
FMOC-S-叔丁基-L-半胱氨酸/FMOC-硫代叔丁基-半胱氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-S-叔丁基-L-半胱氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-硫代叔丁基-L-半胱氨酸/Fmoc-Cys(tBu)-OH 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;1g
甘氨酸叔丁酯鹽酸鹽/鹽酸甘氨酸叔丁酯/氨基乙酸叔四丁酯鹽酸鹽/甘氨酸叔丁基酯鹽酸鹽/Glycine tert butyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;25g
L-谷氨酸鉀鹽/L-谷氨酸鉀鹽單合物/Potassium L-glutamate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,BR 包裝;5g
小隱孢子蟲PCR檢測試劑盒Alicyclobacillus│acidocaldarius 中文名稱:酸熱脂環(huán)酸芽胞桿菌種屬:Alicyclobacillus│acidocaldarius提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:437生長條件:60℃存儲條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:97%
Geobacillus│thermoleovorans 中文名稱:喜熱嗜油地芽胞桿菌種屬:Geobacillus│thermoleovorans提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:266生長條件:60℃存儲條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:97%
Achromobacter│denitrificans 中文名稱:木糖氧化產(chǎn)堿菌反硝化亞種種屬:Achromobacter│denitrificans提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:26℃存儲條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:97%
Beijerinckia│indica 中文名稱:印度拜葉林克氏菌種屬:Beijerinckia│indica提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:3生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:97%
Xenorhabdus│nematophila 中文名稱:嗜線蟲致病桿菌種屬:Xenorhabdus│nematophila提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:26℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:97%
Xanthomonas│campesfris 中文名稱:野油菜黃單胞菌(甘藍黑腐病黃單胞菌, 野油菜桿菌)種屬:Xanthomonas│campesfris提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:1生長條件:27℃存儲條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:98%
Bacillus│lentus 中文名稱:遲緩芽胞桿菌種屬:Bacillus│lentus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:28-30℃存儲條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:98%
Bacillus│thuringiensis subsp.pacificus 中文名稱:蘇云金桿菌太平洋亞種種屬:Bacillus│thuringiensis subsp.pacificus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:98%