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      上海研生生化試劑有限公司

      當(dāng)前位置:上海研生生化試劑有限公司>>定量PCR試劑盒>>熒光定量PCR試劑盒>> 50次環(huán)孢子蟲探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒

      環(huán)孢子蟲探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒

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      具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

      產(chǎn)品型號(hào)50次

      品牌

      廠商性質(zhì)代理商

      所在地上海市

      更新時(shí)間:2024-08-26 15:23:30瀏覽次數(shù):778次

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      環(huán)孢子蟲探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

      熒光定量PCR試劑盒技術(shù):
      產(chǎn)品僅用于科研本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分,并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。
      客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

       產(chǎn)品名稱

      環(huán)孢子蟲探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒

       英文名稱

       Cyclospora cayetanensis

       貨號(hào)

       YSP96605

      樣品RNA的抽提:
      ①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
      ②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
      ④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
      ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
      ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
      2 RNA質(zhì)量檢測(cè)
      1)紫外吸收法測(cè)定
      先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
      ① 濃度測(cè)定
      A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計(jì)算公式為:A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 g/ml。
      實(shí)驗(yàn)過程:
      一、試劑準(zhǔn)備
      1. DNA模板
      2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
      3.10×PCR Buffer
      4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
      5.Taq酶
      二、操作步驟
      1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
          10×PCR buffer             5μl
            dNTP mixl                 4μl
            引物1(10pM)               2μl
            引物2(10PM)              2μ
            Taq酶(2U/μl)            1μl
            DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
            加ddH2O至               50 μl
         視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
      2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
      3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
      4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)
      三、注意事項(xiàng)
      1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
      2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
      3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
      (1,1,3,四甲基丁基)酚(>93.0%(GC))CACYBP Antibody羧基酸

      2,2-雙(羥基)烷(>99.0%(GC))Phospho-CaMKII (Tyr231) Antibody2-氯-(三氟甲基)酸

      2,2-雙()-1,1-二氯乙烷(>98.0%(GC))CaMKII-α Antibody芐基酮

      2,2-雙()-1,1-二氯乙(>99.0%(GC))PI3 Kinase Class III (D4E2) Rabbit mAb6-溴己酸乙酯

      2,二氯酚(>98.0%(GC))PI3 Kinase Class III (D4E2) Rabbit mAb三氟甲酸甲酯

      2,二氯酚(>98.0%(GC))ATF-3 (D2Y5W) Rabbit mAb溴

      1,2-二溴-氯烷(1mg/mL的甲溶液)Phospho-TORC1/CRTC1 (Ser151) Antibody氟硫酚

      鄰二甲酸丁芐酯(>97.0%(GC))RagC Antibody2-氨基-2-乙基丁酸

      鄰二甲酸二戊酯(>98.0%(GC))CaMKII (pan) Antibody聚乙磺酸鈉

      鄰二甲酸二丁酯(>97.0%(GC))Sox9 (D8G8H) Rabbit mAb (Biotinylad)甲氨基乙鹽酸鹽

      鄰二甲酸二環(huán)己酯(>99.0%(GC))Dicer Antibody氨基-2,6-二氯吡啶

      鄰二甲酸二乙酯(>98.0%(GC))Dicer Antibody2-(N-Boc-哌啶基)乙

      鄰二甲酸雙(2-乙基己基)酯(>98.0%(GC))Drosha (D28B1) Rabbit mAbBoc-L-蘇氨酸

      鄰二甲酸二酯(>98.0%(GC))Drosha (D28B1) Rabbit mAb(R)-2-氨甲基-1-N-Boc-吡咯烷

      鄰二甲酸二己酯(>98.0%(GC))CaMKI-δ Antibody10-氮(雜)蒽

      三丁基氯化錫(>97.0%(T))Neuropilin-2 (D39A5) XP® Rabbit mAb氯-2-氟酚

      3,并芘(升華精制品)(>95.0%(GC))Neuropilin-2 (D39A5) XP® Rabbit mAb氯-氟酚

      雙(乙酰)二硫化物(>98.0%(HPLC))GST (26H1) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2-甲基-6-三氟甲基吡啶-羧酸
      環(huán)孢子蟲探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)ELISA試劑盒PN/MMAC1(CT)  一種腫瘤抑制基因抗體(C端)20 ul

      角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒Phospho-PN (Ser380)  酸化腫瘤抑制基因PN抗體100 ul

      膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒Phospho-PN (Ser380/Thr382/Thr383)  酸化腫瘤抑制基因PN抗體100 ul

      膠原吡啶交聯(lián)(PYD)ELISA試劑盒PGE2  E2抗體20 ul

      膠原C末端肽(CTX)ELISA試劑盒PTGEs  E合成酶抗體100 ul

      降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒PTHrP/PTHLH  甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白抗體500µl

      降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒PTN  多效生長(zhǎng)因子抗體100 ul

      降鈣素(CT)ELISA試劑盒PTP/PTPase/CD148  蛋白酪氨酸酸酶CD148抗體100 ul

      性酸酶(ALP)ELISA試劑盒PTP-1B  蛋白酪氨酸酸酶-1B100 ul

       

      豬鏈球菌2型探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒

      豬鏈球菌2型探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),

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