產(chǎn)品名稱：前病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱：HIV2 Provirus HIV2PCR
編號(hào)：HE31091-R
類別:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
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反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
技術(shù)原理：
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。
儲(chǔ)需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
保存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
乳糖肉湯培養(yǎng)基/Lactose Broth Medium 包裝;25g

煌綠乳糖膽鹽肉湯/BGLB肉湯/煌綠乳糖膽鹽增菌液/BGLB Broth 包裝;5g

胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ)/TSP肉湯基礎(chǔ)/Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 包裝;1g

溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基/BCP Glucase Peptone Water Medium 包裝;5g

溴甲酚紫葡萄糖肉湯/BCP Glucose Broth 包裝;100g

胰蛋白胨大豆肉湯/胰酪胨大豆肉湯/胰酶大豆肉湯/CASO 肉湯/TSB 包裝;25g

胰酪胨大豆瓊脂/胰酶大豆瓊脂/胰蛋白胨大豆瓊脂/TSA 包裝;500g

胰胨大豆瓊脂斜面/TSA/Tryptic Soy Agar 包裝;1G

堿性蛋白胨/AP 包裝;1g

孟加拉紅瓊脂/孟加拉紅培養(yǎng)基/虎紅瓊脂/Rose Bengal Agar 包裝;25g

酵母粉葡萄糖氯霉素瓊脂/YGC瓊脂/YGC Agar 包裝;5g

Candida Elective 瓊脂/BiGGY瓊脂/坎迪達(dá)尼克森選擇性瓊脂/鉍甘氨酸葡萄糖酵母瓊脂/BiGGY Agar 包裝;1g

DTM培養(yǎng)基/DTM Medium 包裝;250mg

DRBC瓊脂/氯硝胺孟加拉紅瓊脂/氯硝胺虎紅瓊脂/氯硝胺玫瑰紅瓊脂/DRBC Agar 包裝;5g

WORT瓊脂/WORT Agar 包裝;1g

WORT肉湯/WORT Broth 包裝;250mg

改良綠色酵母菌和真菌肉湯 包裝;25g
前病毒PCR檢測(cè)試劑盒Saccharomyces sp. 中文名稱：酵母菌種屬:Saccharomyces sp.提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:YM 培養(yǎng)基:：酵母提取物，3.0 g 麥芽提取物，3.0 g 葡萄糖，10.0 g 蛋白棟，5.0 g 瓊脂，20.0 g 蒸餾1000 ml ，pH 6.2 +/- 0.2生長(zhǎng)條件:25-28℃，好氧存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度：97%

Streptomyces│griseolus 中文名稱：淺灰鏈霉菌種屬:Streptomyces│griseolus提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度：97%

Gomphidius│viscidus 中文名稱：鉚釘菇種屬:Gomphidius│viscidus分離基物:子實(shí)體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:食用真菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:17生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度：98%

Ralstonia eutropha 中文名稱：富養(yǎng)羅爾斯通氏菌種屬:Ralstonia eutropha提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂： 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:30℃，好氧存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度：98%

Sphingobacterium multivorum 中文名稱：多食鞘氨醇桿菌種屬:Sphingobacterium multivorum分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:LB培養(yǎng)基:：酵母提取物 5.0 g 蛋白胨 10.0 g NaCl 10.0 g 瓊脂 15.0 g 蒸餾 1.0 L pH 7.0生長(zhǎng)條件:30℃，好氧存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度：98%

Agrobacterium│tumefaciens 中文名稱：根癌土壤桿菌種屬:Agrobacterium│tumefaciens提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:植物轉(zhuǎn)基因研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：99%

Bacillus│litoralis 中文名稱：岸濱芽孢桿菌種屬:Bacillus│litoralis分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:分類；研究；教學(xué)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:832生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：99%

Brevundimonas│vesicularis 中文名稱：泡囊短波單胞菌種屬:Brevundimonas│vesicularis分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:820生長(zhǎng)條件:29℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：99%