產(chǎn)品名稱:棒狀桿菌屬
貨號:YS-01J12380
拉丁文: corynebacterium│
分離基物: 眼分泌物
提供形式: 凍干物
安全等級: 2
模式菌株: no
培養(yǎng)基: CM0117
生長條件: 36℃
存儲條件: -80℃冰箱凍結法
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
棒狀桿菌屬說明書 | corynebacterium│ | YS-01J12380 |
公司產(chǎn)品僅用于科研培養(yǎng)及打管說明:
1、安瓿瓶開封:用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復培養(yǎng):用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內,輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項:菌種活化前,請將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長
4、復蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開的安瓿及復蘇后需保藏的斜面應于4℃中保藏。
保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
豬鈣/鈣調素依賴性蛋白激酶2α(CAMK2A/CAMKA/KIAA0968)載脂蛋白D抗體
豬脯氨酸羥化酶(PHD)酸敏感離子通道1抗體
豬分泌型免疫球蛋白A(sIgA)雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(C端)
豬肺炎支原體抗體(MP-Ab)髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體
豬肺表面活性物質相關蛋白C(SP-C)腺苷酸環(huán)化酶1抗體
豬肺表面活性物質相關蛋白B(SP-B)腺瘤樣息肉抗體
豬肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)溶血磷脂?;D移酶抗體
豬二氧化酶(DAO)錨蛋白重復及SAM結構域蛋白3抗體
豬兒茶酚(CA)磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體
豬多肽YY(PYY)?;o酶A脫氫酶很長鏈抗體
豬多巴(DA)信號轉導銜接結合蛋白抗體
豬端粒酶(TE)錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體
豬凋亡相關因子(FAS/CD95)有絲分裂激酶B抗體
豬淀粉樣前體蛋白(βAPP)磷酸化Ack1抗體
豬低氧誘導因子1α(HIF-1α)磷酸化Ack1抗體
棒狀桿菌屬說明書枝狀枝孢血管緊張素Ⅱ受體相關蛋白抗體 Daptomycin 質量規(guī)格:≥930μg/mg,BR,可用于培養(yǎng)
中國節(jié)叢孢膜粘連蛋白2受體抗體 Daptomycin 質量規(guī)格:效價測定
麥氏交替單胞菌血管緊張素1轉換酶抑制劑抗體 Daunorubicin HCl 質量規(guī)格:純度大于97%含量84.0-102%,USP30
嗜管歐文氏菌拮抗凋亡轉錄因子抗體 Daunorubicin HCl 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
豬丹絲菌α-1抗胰糜蛋白酶抗體 Daunorubicin HCl 質量規(guī)格:USP,進分sigmaD8809
棒曲霉α-1抗胰蛋白酶抗體 Decitabine 質量規(guī)格:>99.5%,BR,可用于培養(yǎng)
變平滑假絲酵母ATP結合蛋白家族6抗體 Decitabine 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
黑木耳8808三磷酸腺苷結合盒亞家族G1抗體 5-Aza-2′-deoxycytidine 質量規(guī)格:>97%,進分sigma貨號A3656
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。