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      上海研生生化試劑有限公司

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      大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒技術(shù)參數(shù)

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      大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒試劑盒組成
      1 20 倍濃縮洗滌液30ml×1 瓶7 終止液6ml×1 瓶
      2 酶標(biāo)試劑6ml×1 瓶8 標(biāo)準(zhǔn)品(1800 μg/ml) 0.5ml×1 瓶
      3 酶標(biāo)包被板12 孔×8 條9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1 瓶
      4 樣品稀釋液6ml×1 瓶10 說明書1 份
      5 顯色劑A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 張
      6 顯色劑B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 個
      標(biāo)本處理及要求
      1.血清、血漿標(biāo)本可直接測定;
      2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
      3.采集后盡早進(jìn)行實驗,若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反
      復(fù)凍融。
      大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒操作步驟
      1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上按序設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10 孔,在*、第二孔中分別
      加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;再各取100μl 分
      別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后,在第
      三孔和第四孔中先各取50μl 棄掉;再各取50μl 分別加到第五、第六孔中;再在第五、
      第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl 分別加
      到第七、第八孔中;再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、
      第八孔中分別取50μl 加到第九、第十孔中;再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,
      混勻后從第九第十孔中各取50μl 棄掉。( 稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為
      1200 μg/ml ,800 μg/ml,400μg/ml,200μg/ml,100 μg/ml)。
      2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣
      品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣
      品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,輕輕晃動混勻。
      3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
      4. 配液:將20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水20 倍稀釋后備用
      5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此
      重復(fù)5 次,拍干。
      6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
      7. 溫育:操作同3。
      8. 洗滌:操作同5。
      9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
      15 分鐘.
      10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
      11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應(yīng)在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒。

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