ELISA試劑質(zhì)量與儀器使用

1 儀器使用

ELISA方法所用儀器相對(duì)簡(jiǎn)單。移液器要按時(shí)校正，這樣檢驗(yàn)時(shí)酶標(biāo)儀效果會(huì)更好。接下來重點(diǎn)講述一下洗板機(jī)的使用問題。洗板機(jī)經(jīng)常出現(xiàn)的問題有：吸液針頭要接觸酶標(biāo)板的板底才能吸干凈，而觸碰板底將會(huì)對(duì)包被物產(chǎn)生影響;手工洗板容易和污染。我們做了手工洗板和機(jī)洗板的比較，除了手工洗板比機(jī)洗板空白值略低外，其它沒有區(qū)別。

洗板機(jī)的使用過程中要注意三個(gè)方面:（1）洗不同的酶標(biāo)板時(shí)，注意調(diào)整吸液頭的下降高度，以免因高不適使沖洗針頭卡住酶標(biāo)板;（2）當(dāng)吸液針頭有破損時(shí)，吸液端由平端變?yōu)榧怃J，板底包被物被破壞可能性增加，對(duì)結(jié)果影響較大，應(yīng)及時(shí)更換;（3）洗液量的控制問題，洗液不足會(huì)導(dǎo)致洗滌不干凈，尤其是邊緣殘留的酶標(biāo)物，洗液太多就容易溢出，另外不同試劑的酶標(biāo)板所使用的洗液量也有可能不同，所以在選擇洗液量的時(shí)候要特別注意。

2 試劑質(zhì)量

 ELISA試劑盒、顆粒凝集和其它快速診斷試劑。對(duì)于試劑本身的質(zhì)量問題，試劑的穩(wěn)定性、敏感性和特異性等指標(biāo)，由于基層實(shí)驗(yàn)室不能得到血清轉(zhuǎn)化盤和大量的陽性標(biāo)本，不可能進(jìn)行自己測(cè)定 。

在牛ELISA試劑盒操作中，試劑在測(cè)定前一定要在室溫下恒溫30min，如果不經(jīng)過恒溫過程，儲(chǔ)存溫度和室溫的差異會(huì)使酶標(biāo)板上凝集一些小水珠，也使開始反應(yīng)的溫度不恒定，影響到抗原抗體的結(jié)合與反應(yīng)的速度。

在儲(chǔ)存上，一般在2～8℃，特別注意試劑盒不能緊貼冰箱儲(chǔ)存室后壁擺放，否則試劑會(huì)被冰凍，復(fù)融后試劑的總體效價(jià)將嚴(yán)重偏低，不能使用。