產(chǎn)品概述
部分 Amaxa®Nucleofector®技術(shù)
原理 Amaxa
®Nucleofector
®技術(shù)是 Lonza(原Amaxa)公司的創(chuàng)新技術(shù)，它綜合應(yīng)用傳統(tǒng)的電穿孔技術(shù)及細(xì)胞特異性細(xì)胞核轉(zhuǎn)染液，通過(guò)調(diào)整優(yōu)化的電轉(zhuǎn)參數(shù)（內(nèi)存轉(zhuǎn)染程序），直接把外源基因?qū)朐?xì)胞及細(xì)胞系的細(xì)胞漿和細(xì)胞核中。
外源基因直接導(dǎo)入核內(nèi) Normal human dermal fibroblasts –neonatal were nucleofected with 2.5 μg TMR-labeled plasmid DNA encoding eGFP. Fixation of cells was performed after 2 hours with 3.5 % PFA. TMR label is shown in (A), GFP fluorescence in (B), DAPI nuclear staining in (C) and a merge of all three fluorescent labels in (D).
泛細(xì)胞類型的高效轉(zhuǎn)染 維持細(xì)胞生理功能 Human H9 ES cells preserve pluripotency post Nucleofection. H9 cells were transfected by Nucleofection with the pmaxGFP Vector. (Left) Cells analyzed after 24 hours show expression of GFP (green) as well as of the pluri potency markers SSEA4 (red) and Oct4 (purple). The blue signals refer to nuclear staining by DAPI. (Right) The percentage of double- positive cells (GFP/SSEA) was analyzed by flow cytometry. (Data kindly provided by Jennifer Moore, Rutgers University, Piscataway, USA.)
第二部分 4D Nucleofector®系統(tǒng)
——多方位的轉(zhuǎn)染平臺(tái)
全新的4D Nucleofector®系統(tǒng)采用模塊化設(shè)計(jì)和導(dǎo)電性聚合物技術(shù)，為使用者提供更加靈活的選擇和更的轉(zhuǎn)染性能。 - 不同的應(yīng)用需求，選擇不同的細(xì)胞數(shù)
同一Protocol適用于100μl、20μl兩種體積；
100μl電轉(zhuǎn)杯適用于大細(xì)胞數(shù)(高達(dá)2×10
7)轉(zhuǎn)染；
20μl電轉(zhuǎn)板條適用于小細(xì)胞數(shù)(低至2×10
4)轉(zhuǎn)染
- 不同的實(shí)驗(yàn)要求，選擇不同的通量
靈活的通量選擇（1-16樣本數(shù)）；
1或2個(gè)100μl電轉(zhuǎn)杯的平行操作；
1-16個(gè)板條孔的平行操作
- 不同的原代細(xì)胞類型，5種轉(zhuǎn)染試劑盒供選擇 - 原位轉(zhuǎn)染技術(shù)實(shí)現(xiàn)了生理狀態(tài)下（貼壁培養(yǎng)過(guò)程中）的轉(zhuǎn)染，如Basic Neuron Nucleofector® AD轉(zhuǎn)染試劑盒 - 電極材料：導(dǎo)電性聚合物的應(yīng)用 組成 由Core Unit和X Unit（個(gè)上市的功能單元）組成。多種功能單元（Y unit、Z unit）的持續(xù)研發(fā)和陸續(xù)上市。
- 靈活的組裝方式：平行拼接或疊放。
- USB接口與電腦連接：軟件升級(jí)和數(shù)據(jù)傳送
- 可接駁96孔shuttle轉(zhuǎn)染儀
的導(dǎo)電性聚合物電轉(zhuǎn)杯和電轉(zhuǎn)板條 - 的導(dǎo)電性聚合物材料替代傳統(tǒng)的金屬電極
- 克服傳統(tǒng)金屬電極釋放的金屬離子（Al
3+對(duì)細(xì)胞的毒性）對(duì)轉(zhuǎn)染結(jié)果的影響。
- 提高（或維持）轉(zhuǎn)染效率的同時(shí)，保證細(xì)胞的生理特性。
- 規(guī)格：滿足不同細(xì)胞量的轉(zhuǎn)染要求
單孔電轉(zhuǎn)杯（100μl）
16孔電轉(zhuǎn)板條（20μl）
第三部分 4D Nucleofector®系統(tǒng)技術(shù)參數(shù)和物理參數(shù)
技術(shù)參數(shù) 1、原理：綜合應(yīng)用電穿孔技術(shù)和細(xì)胞特異性細(xì)胞核轉(zhuǎn)染液，可直接將外源基因?qū)爰?xì)胞核中。
2、轉(zhuǎn)染程序
2．1針對(duì)不同的細(xì)胞類型，內(nèi)存有優(yōu)化好的轉(zhuǎn)染程序
2．2 特異轉(zhuǎn)染程序≥ 160種
2．3 轉(zhuǎn)染程序可持續(xù)升級(jí)
3、轉(zhuǎn)染液
*3．1針對(duì)不同的細(xì)胞類型，提供不同的配套試劑盒，包括三種細(xì)胞系試劑盒和五種原代細(xì)胞試劑盒
3．2含有細(xì)胞特異性細(xì)胞核轉(zhuǎn)染液，輔助細(xì)胞核轉(zhuǎn)染儀，已達(dá)到高效的轉(zhuǎn)染效率和高的細(xì)胞存活率
3．3 含有陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒 PmaxGFP
4、細(xì)胞轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù)庫(kù)
含針對(duì)多種細(xì)胞的轉(zhuǎn)染完整操作數(shù)據(jù)庫(kù)，包括細(xì)胞處理、轉(zhuǎn)染效率、細(xì)胞轉(zhuǎn)染后存活率等各方面驗(yàn)證方案。
5、靈活的規(guī)格：微量和超大量共存的細(xì)胞轉(zhuǎn)染。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置靈活選擇不同的轉(zhuǎn)染規(guī)格。即可使用100ul電轉(zhuǎn)杯，也可選擇20ul電轉(zhuǎn)板條。
5.1 100ul轉(zhuǎn)染體積適用于大細(xì)胞數(shù)轉(zhuǎn)染（高達(dá)2*10
7/反應(yīng)），用于轉(zhuǎn)染后的生化應(yīng)用、WB檢測(cè)等；
5.2 20ul轉(zhuǎn)染體積適用于小細(xì)胞數(shù)轉(zhuǎn)染（低至2*10
4/反應(yīng)），用于報(bào)告基因分析、RNA干擾等。
5.3 不同的轉(zhuǎn)染體積，轉(zhuǎn)染條件可平移，使用同一Protocol。
6. 靈活的通量：低—中等通量（1-16樣本數(shù)）應(yīng)實(shí)驗(yàn)要求靈活選擇。
7、電極材料：的導(dǎo)電性聚合物，提高（或）維持轉(zhuǎn)染效率的同時(shí)，保證細(xì)胞的生理特性
8. 原位（貼壁）轉(zhuǎn)染：可進(jìn)行原位（貼壁）轉(zhuǎn)染，改變傳統(tǒng)電穿孔技術(shù)只能在細(xì)胞懸液中進(jìn)行轉(zhuǎn)染，實(shí)現(xiàn)了一些原代細(xì)胞在正常生理狀態(tài)下（即貼壁培養(yǎng)過(guò)程中）的轉(zhuǎn)染。
9. 可和96孔細(xì)胞核轉(zhuǎn)染儀組合，為其提供脈沖。
10. 可以連接Y unit，直接在標(biāo)準(zhǔn)的24孔培養(yǎng)板中直接進(jìn)行轉(zhuǎn)染。
物理參數(shù) | 1、電轉(zhuǎn)參數(shù) | 電流 | 140 VA 0.4A |
| 電壓 | 230VAC+10%/-20% ；或110VAC+10%/-20% |
| 電擊時(shí)間長(zhǎng)短 | 根據(jù)選用程序定時(shí)間長(zhǎng)短 |
| 2、工作頻率 | 50-60Hz，自我調(diào)節(jié) |
| 3、體積重量 | 45×10.5×28cm（包括核心單元和X單元） |
| 8.0kg（包括核心單元和X單元） |
| 4、開機(jī) | 開機(jī)自檢 |
第四部分 Nucleofector轉(zhuǎn)染平臺(tái)一覽表
| | 基礎(chǔ)平臺(tái) | 高級(jí)平臺(tái) | 96孔平臺(tái) | 高通量平臺(tái) |
| 設(shè)備名稱 | Nucleofector 2b
單孔細(xì)胞核轉(zhuǎn)染儀 | 4D-Nucleofector system
4D細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng) | Nucleofector 96-well shuttle
96孔細(xì)胞核轉(zhuǎn)染儀 | HT Nucleofector system
高通量細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng) |
| 設(shè)備圖片 |  |  |  |  |
| 通量 | 低通量（1孔） | 低-中通量（1-16孔） | 低-中通量（1-96孔） | 高通量（384孔） |
| 體積 | 100μl | 20μl+100μl | 20μl | 20μl |
| 電極材料 | 鋁離子 | 導(dǎo)電聚合物 | 導(dǎo)電聚合物 | 導(dǎo)電聚合物 |
| 小細(xì)胞數(shù)(20μl) | -- | 2 x 104 --- 1 x 106 | 2 x 104 --- 1 x 106 | 2 x 104 --- 1 x 106 |
| 大細(xì)胞數(shù)(100μl) | 2 x 105 --- 2 x 107 | 2 x 105 --- 2 x 107 | -- | -- |
原位轉(zhuǎn)染
(20μl電轉(zhuǎn)板條) | -- | √ | √ | -- |
| 與96孔shuttle兼容性 | IIS版本兼容
IIb和IIN不兼容 | √ | -- | -- |
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