?使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 |
黑芝麻探針法PCR鑒定試劑盒 | Semen sesami nigrum | 50次 |
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黑芝麻探針法PCR鑒定試劑盒我公司即用型PCR試劑盒:
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸、-20℃保存,有效期一年。
本產(chǎn)品是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反應(yīng)(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
?用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
?Ophiocordyceps Sinensis冬蟲夏草PCR鑒定試劑盒7-氧代-beta-谷甾醇
Ophiocordyceps Sinensis冬蟲夏草染料法PCR鑒定試劑盒7-氧代扁柏脂素
Ophiocordyceps Sinensis冬蟲夏草探針法PCR鑒定試劑盒7-酸-5,7-二羥基雙黃酮酯
Pericarpium arecae大腹皮LAMP鑒定試劑盒7-異戊烯氧基-gamma-花椒
Pericarpium arecae大腹皮PCR鑒定試劑盒8(14),15-異海松二烯-3,18-二醇
Pericarpium arecae大腹皮染料法PCR鑒定試劑盒8-羥基-4-蓽澄茄烯-3-酮
Isoprenaline Hydrochloride 鹽酸異腎上腺素Myxosporidia spp.黏孢子蟲屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
Sodium Phosphotungstate 磷鎢酸鈉NADC30-like Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(NADC30-like PRRSV)豬與呼吸綜合癥病毒美洲型NADC30株RT-PCR試劑盒
Sodium Phosphotungstate 磷鎢酸鈉NADC30-like Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(NADC30-like PRRSV)豬與呼吸綜合癥病毒美洲型NADC31株染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
Sodium Phosphotungstate 磷鎢酸鈉NADC30-like Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(NADC30-like PRRSV)豬與呼吸綜合癥病毒美洲型NADC32株探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
L-Hydroxyproline L-羥基脯氨酸Naegleria spp.納氏蟲屬通用·PCR試劑盒
L-Hydroxyproline L-羥基脯氨酸Naegleria spp.納氏蟲屬通用·染料法熒光定量PCR試劑盒
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR