第一章概述1
第一節(jié)液相色譜及其聯(lián)用技術(shù)1
一、液相色譜技術(shù)1
二、聯(lián)用技術(shù)4
第二節(jié)氣相色譜及其聯(lián)用技術(shù)5
一、色譜柱6
二、檢測器6
三、選擇氣相色譜分離條件的一般原則6
四、氣相色譜聯(lián)用技術(shù)7
參考文獻8
第二章脫氧核糖核酸(DNA)的電泳與色譜分析10
第一節(jié)DNA的提取和PCR擴增10
一、概述10
二、DNA提取 11
三、基因突變的檢測12
第二節(jié)DNA的液相色譜分析17
一、DNA的變性高效液相色譜分析17
二、應(yīng)用實例23
第三節(jié)DNA的電泳分析28
一、DNA的電泳分析28
二、應(yīng)用實例33
參考文獻39
第三章生物技術(shù)藥物的純化及鑒定46
第一節(jié)生物技術(shù)藥物的分離純化46
一、蛋白質(zhì)藥物的純化46
二、核酸及寡核苷酸藥物的純化54
第二節(jié)蛋白質(zhì)性質(zhì)的鑒定58
一、純度鑒定58
二、含量測定65
三、氨基酸組成分析65
四、N末端序列分析71
五、C末端序列分析78
六、等電點測定80
七、肽指紋圖譜81
第三節(jié)核酸的性質(zhì)鑒定83
一、核酸中堿基的分析84
二、LCMS分析寡核苷酸的純度86
三、離子對反相色譜分析寡核苷酸階梯序列87
第四節(jié)糖類生物藥物分析88
一、糖類藥物的分析89
二、多糖中單糖組成分析91
三、糖類分析中的氣相色譜及其衍生化技術(shù)96
四、糖蛋白中糖的組成分析99
參考文獻103
第四章生物標志物的色譜分析108
第一節(jié)樣品的采集和預處理108
一、樣品的采集和保存108
二、生物樣品的一般預處理方法111
三、待測組分的提取113
四、幾種常用的樣品處理技術(shù)116
第二節(jié)體內(nèi)氨基酸的測定118
一、體液氨基酸譜的HPLC分析118
二、LCMS/MS用于新生兒氨基酸代謝紊亂的篩查119
三、同型半胱氨酸的HPLC測定121
四、3甲基組氨酸的測定123
第三節(jié)體液中兒茶酚胺的測定124
一、體液中兒茶酚胺的分析及樣品處理124
二、應(yīng)用實例125
第四節(jié)體內(nèi)天然甾體化合物的測定130
一、天然甾體化合物及其測定方法130
二、應(yīng)用實例132
參考文獻137
第五章色譜在蛋白質(zhì)組學研究中的應(yīng)用140
第一節(jié)前沿140
第二節(jié)生物樣品的處理方法142
一、勻漿破碎142
二、固體研磨破碎法143
三、超聲破碎法144
四、蛋白質(zhì)清洗和提取144
第三節(jié)色譜方法在蛋白質(zhì)預分離和鑒定中的應(yīng)用145
一、色譜方法的預分離145
二、液質(zhì)聯(lián)用方法對整體蛋白質(zhì)直接分析148
三、液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在整體蛋白質(zhì)直接分析中的應(yīng)用150
四、色譜預分離與液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在復雜蛋白質(zhì)混合物分析中的應(yīng)用154
第四節(jié)色譜方法在多肽分離和鑒定中的應(yīng)用160
一、一維液質(zhì)聯(lián)用對簡單肽混合物的分離鑒定160
二、二維液質(zhì)聯(lián)用對復雜多肽混合物的分離鑒定162
三、液質(zhì)聯(lián)用方法用于嚴重急性呼吸系統(tǒng)綜合征冠狀病毒結(jié)構(gòu)蛋白
質(zhì)的分析鑒定163
第五節(jié)色譜方法在翻譯后修飾蛋白質(zhì)組研究中的應(yīng)用169
一、色譜在磷酸化修飾蛋白質(zhì)組研究中的應(yīng)用169
二、IMAC親和提取結(jié)合生物質(zhì)譜用于磷酸化修飾蛋白質(zhì)的分析鑒定171
三、色譜方法在糖基化修飾蛋白質(zhì)和多肽研究中的應(yīng)用182
四、凝集素親和色譜毛細管液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用用于N糖基化修飾蛋白質(zhì)及修
飾位點分析186
第六節(jié)色譜方法在定量蛋白質(zhì)組研究中的應(yīng)用簡介190
參考文獻193
符號表198
本書為色譜技術(shù)叢書中的一冊,全書共有五章,簡要介紹了目前在生命科學研究中常用的色譜技術(shù),詳細討論了這些技術(shù)在脫氧核糖核酸分析、生物技術(shù)藥物的純化鑒定、生物標
志物檢測,以及蛋白質(zhì)組研究中的應(yīng)用。
書中以較大的篇幅列舉了各種應(yīng)用實例,便于讀者在實際工作中參考。
本書可供基礎(chǔ)醫(yī)學,臨床化學和生物制藥領(lǐng)域的研究人員、技術(shù)人員參考使用。